一生佳導語(yǔ)

過(guò)去人們一致認為基因突變與腫瘤發(fā)生有著(zhù)密切關(guān)系，后來(lái)研究發(fā)現基因序列完全相同的同卵雙胞胎們易患癌癥的可能性不相同，這一發(fā)現為腫瘤研究又開(kāi)辟了一條思路：表觀(guān)遺傳修飾在腫瘤發(fā)生中起著(zhù)關(guān)鍵作用，如何發(fā)揮作用呢，是否能夠利用表觀(guān)修飾研究抗擊腫瘤呢？

探尋本質(zhì)

DNA甲基化異常在腫瘤等多種疾病的發(fā)生、發(fā)展中起著(zhù)重要作用。在正常細胞中，基因組通常為整體高甲基化水平，某些特定區域為低甲基化水平；而腫瘤細胞中DNA的甲基化水平處于異常狀態(tài)：基因組整體甲基化水平降低，抑癌基因的啟動(dòng)子區域出現過(guò)度甲基化，癌基因多為不充分甲基化。

研究技術(shù)

目前發(fā)現和腫瘤發(fā)生有著(zhù)緊密聯(lián)系的是5mC（胞嘧啶甲基化）。基于NGS研究5mC的技術(shù)有全基因組甲基化測序（WGBS）、簡(jiǎn)化基因組甲基化測序（RRBS）、免疫沉淀甲基化測序（MeDIP-seq）、目標區域甲基化測序（Target-BS）等。其中WGBS是DNA甲基化研究的金標準，通過(guò)重亞硫酸鹽處理結合高通量測序技術(shù)，從單堿基水平來(lái)檢測基因組的甲基化情況，分辨率高，CpG位點(diǎn)覆蓋度可達95%。

案例解析

伯基特淋巴瘤和濾泡性淋巴瘤都具有生發(fā)中心B細胞的特點(diǎn)，但是其生物學(xué)及臨床特征差異很大。本研究采用全基因組甲基化測序（WGBS）、基因組測序及轉錄組測序技術(shù)分別對伯基特淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤及正常生發(fā)中心B細胞進(jìn)行分析比較，發(fā)現基因突變、甲基化修飾及轉錄表達共同參與B細胞淋巴瘤的差異調控。

用于判斷癌癥患病風(fēng)險的臨床病理標準和分子方法很多。但目前仍沒(méi)有有效的方法去判斷經(jīng)過(guò)標準治療的病人是否發(fā)生微轉移。本研究通過(guò)全基因組甲基化測序技術(shù)（WGBS）研究cfDNA甲基化差異來(lái)預測乳腺癌是否發(fā)生轉移。通過(guò)將發(fā)生轉移的患者（MBC）與健康人（H）及標準治療后痊愈患者（DFS）的甲基化水平相比發(fā)現，有~5.0×106個(gè)甲基化差異位點(diǎn)。總體來(lái)看，MBC樣本整體為低甲基化水平、CpG島呈現高甲基化水平，且通過(guò)數據分析發(fā)現在CpG島中有21個(gè)新熱點(diǎn)區域，與H和DFS有顯著(zhù)差異。通過(guò)目標區域甲基化（Target-BS）技術(shù)對4個(gè)熱點(diǎn)區域相關(guān)基因進(jìn)行驗證，發(fā)現結果與WGBS結果高度一致，且MBC樣本中基因甲基化水平顯著(zhù)高于DFS和H。