小兒幽門(mén)螺桿菌感染 的檢查：

尿素酶試驗 直接涂片檢查 幽門(mén)螺旋桿菌的直接檢查 幽門(mén)螺旋桿菌血清學(xué)測試 纖維胃鏡檢查 14C呼氣試驗 免疫印跡技術(shù) 幽門(mén)螺旋桿菌的免疫學(xué)檢測 胃液尿素測定 呼氣試驗

Hp的診斷方法有多種，主要分為兩大類(lèi)：直接法和間接法。
1.細菌的直接檢查 用培養、PCR、組織學(xué)方法直接檢測胃黏膜內的Hp。
(1)培養法：通過(guò)胃鏡鉗取胃竇黏膜作Hp培養是最精確的診斷方法，可作為驗證其他診斷性試驗的金標準。此外，還可提供細菌的藥物敏感試驗，指導臨床選用藥物，尤其是治療失敗者或生活在Hp耐藥性很高的國家與地區。Hp培養法特點(diǎn)是特異性高，但敏感性居中，操作技術(shù)難，耗費時(shí)間較長(cháng)，培養需3～6天，即使是有經(jīng)驗的實(shí)驗師操作，培養成功率也僅達75%～95%。影響Hp生長(cháng)，造成假陰性結果的因素有許多，如培養標本不含Hp;胃鏡檢查時(shí)吞咽表面麻醉劑;活檢鉗污染;或最近使用過(guò)抗生素或鉍劑，這些均能抑制細菌生長(cháng)。此外標本接種時(shí)間與分離培養基是否新鮮也有關(guān)。
最近報道從人的糞便中也可培養出Hp，但需在微氧的環(huán)境下離心，濃縮細菌而獲得，因為目前只能在50%Hp定植患者的糞便中檢出，所以對此非侵襲方法尚需作進(jìn)一步研究。
(2)組織切片法：另一種Hp的直接檢查法，能提供組織形態(tài)學(xué)的信息，因為Hp定居在人胃黏液的黏液下層，上皮細胞表面，正常情況下該部位不存在其他細菌，因此根據在組織切片上的形態(tài)特點(diǎn)和分布特征 (在胃黏液和胃腔之間存在螺旋桿菌狀物)，即可診斷Hp感染，是較可靠的方法。組織學(xué)檢查特點(diǎn)是敏感性高，可同時(shí)做病理檢查，并可永久保存資料。染色方法很多，包括HE染色、Gram染色、碳酸復紅染色、W-S(Warthin-Starry)染色、Giemsa(吉姆薩)染色等。革蘭染色，因檢出率低幾乎已不用;標準HE染色能檢出Hp，但也不是可靠的方法，W-S銀染是很好的技術(shù)，盡管價(jià)格和技術(shù)要求高，由于檢測有效，臨床應用較為普遍，吉姆薩染色費用較少，一些作者認為此方法在質(zhì)量上與W-S銀染相等。
除常規的組織學(xué)檢查外，還有免疫化學(xué)和免疫熒光方法，但需使用免疫熒光鏡和免疫抗體，使檢查變得更昂貴，且又不能提供常規組織學(xué)發(fā)現以外的信息，因而不能常規使用，多用于實(shí)驗室研究。
(3)直接涂片染色：用相差顯微鏡直接檢查涂于玻片上的胃黏液中Hp。可用吖啶橙染色、革蘭染色、Giemsa染色。
(4)PCR(聚合酶聯(lián)反應)：PCR是檢測Hp是否存在另一種方法，特點(diǎn)是即能快速檢測到新鮮胃黏液標本中的Hp，也能檢測石蠟包埋的活檢樣本。PCR的引物對所有Hp菌株是特異的，故具有高度特異性。和快速尿素酶、培養法和組織學(xué)比較，PCR又具有高度敏感性。但一些隱匿的因素能影響此高度的敏感性和特異性，如內鏡和活檢鉗清洗、消毒不嚴導致DNA污染，使特異性降低，使敏感性降低的因素有細菌在胃黏膜的斑塊狀定植或PCR抑制因素的存在。PCR可用于Hp感染的臨床診斷，流行病學(xué)調查，Hp的分子遺傳學(xué)研究。
2.細菌的間接檢查 利用細菌的生物特性，特別是Hp水解尿素的能力而產(chǎn)生呼氣試驗，尿素酶試驗。血清學(xué)因不能提供細菌當前是否存在的依據，故不能用于目前感染的診斷，主要用于篩選或流行病學(xué)調查。對臨床醫師來(lái)說(shuō)。根據醫院的條件，選擇合適的方法用于病人是重要的，目前主要采用聯(lián)合方法診斷。
(1)快速尿素酶試驗：因Hp是人胃內惟一能夠產(chǎn)生大量尿素酶的細菌，故可通過(guò)檢測尿素酶來(lái)診斷Hp感染。尿素酶分解胃內的尿素生成氨和二氧化碳，使尿素濃度降低，氨濃度升高。基于此原理，已發(fā)展了多種檢測方法。
胃黏膜活檢組織快速尿素酶試驗為目前臨床應用最廣泛的一種方法，具有簡(jiǎn)便、實(shí)用快速、靈敏等優(yōu)點(diǎn)，但受細菌數量影響，活檢組織中Hp數量很少時(shí)，易出現假陰性;在使用鉍劑、氨芐西林，甚至H2受體拮抗藥治療后，尿素酶試驗的敏感性明顯降低，故此方法主要用于最初檢測Hp感染。目前所用的方法有如下兩種。
①pH指示劑法：試劑中含有尿素和pH指示劑(如酚紅pH 6.8時(shí)為黃棕色，pH 8.4時(shí)為粉紅色)。從胃內取出的標本通常呈酸性(pH<6.0)，一般情況下試劑的顏色不變，如果胃內有Hp感染，當黏膜標本放入試劑中，Hp所產(chǎn)生的尿素酶則分解尿素產(chǎn)生氨，使pH值升高，試劑變?yōu)榉奂t色。
②分析化學(xué)法：采用分析化學(xué)原理檢測Hp尿素酶的最終產(chǎn)物，由于陽(yáng)性顯色反應不是取決于試劑中pH改變，可以避免一些影響pH的因素所致的假陰性。福建三強生化有限公司生產(chǎn)的CPUT試劑盒屬于這種方法，可半定量指示Hp感染的程度( 、 、 、 )。
(2)呼氣試驗：用核素標記尿素，口服后測定呼氣中標記的CO2量，能間接反映尿素酶的量，屬非侵入性檢查。呼氣試驗具有快速、可靠、安全、無(wú)痛苦的優(yōu)點(diǎn)，適合大規模流行病學(xué)調查，表明目前是否有Hp感染，而不是曾否有過(guò)感染，因此優(yōu)于血清學(xué)檢查。有研究發(fā)現服用膠態(tài)次枸櫞酸鉍劑2h后，即可見(jiàn)14CO2量明顯降低，因此用于療效觀(guān)察是一種較敏感的指標，也是隨訪(fǎng)的一種理想方法。呼氣試驗根據標記物的不同，分為13C-尿素呼氣試驗(breath test)和14C-尿素呼氣試驗。
(3)13C-尿素呼氣試驗：受試者口服13C-尿素5mg/kg，隨后每10min收集一次呼氣標本，連續3h。如果胃內有Hp感染，口服的13C-尿素溶液在尿素酶的作用下分解成13CO2，經(jīng)胃腸道吸收后呼出。收集的氣體標本用質(zhì)譜儀分析，計算13CO2含量。有Hp感染者在口服試液后20min即出現13CO2升高，在100min內持續升高，而無(wú)Hp感染者無(wú)13CO2呼出。13C為穩定性核素，無(wú)放射性，可反復檢查。但13CO2測定較為復雜，需用質(zhì)譜儀，費用昂貴，多數醫院尚不能開(kāi)展。
(4)14C-尿素呼氣試驗：為了克服13C-尿素呼氣試驗操作復雜、費用昂貴的缺點(diǎn)，用14C-尿素取代13C-尿素，得到同樣滿(mǎn)意的效果。檢測14C用液體閃爍計數器即可，因而更為實(shí)用。其缺點(diǎn)是14C有一定的放射性，不適合于孕婦及兒童。
影響呼氣試驗精確性因素：假陰性結果最常見(jiàn)原因是用抗生素、鉍劑或奧美拉唑不久后做的呼氣試驗(一般要求在治療結束后至少1個(gè)月再進(jìn)行);其次是尿素從胃排空過(guò)快或樣本收集太遲。假陽(yáng)性結果為體內存在或口腔內存在有尿素酶活性的細菌。
但呼氣試驗僅能提供Hp存在的信息，而不能區分消化道疾病，無(wú)法代替胃鏡檢查，不能作為有上消化道癥狀兒童的最初評價(jià)方法。
(5)血清學(xué)檢查：Hp的血清學(xué)診斷是非侵襲和間接的方法，主要用于流行病學(xué)或篩選，不能單純作為Hp感染最初的診斷工具，除非和其他方法聯(lián)合應用。血清學(xué)檢查的基礎是Hp具有誘導機體局部和全身產(chǎn)生免疫反應的能力，用細菌凝集、補體結合和ELISA三種方法能檢測到Hp抗體，ELISA由于操作簡(jiǎn)單，診斷快速，價(jià)格便宜和敏感性高等因素，故臨床應用較多。
ELISA方法有2種：
①定性試驗：以陰或陽(yáng)性表示，不僅用于血清，也可用于唾液、牙齦分泌物，特別適用兒童，缺點(diǎn)是假陽(yáng)性率高，故陽(yáng)性結果常需補充另一個(gè)肯定方法。
②定量試驗：由機器測試，結果更精確，還可用于治療后的隨訪(fǎng)檢查。
血清學(xué)試驗由于為非侵入性且簡(jiǎn)單在兒童中應用受歡迎，是一個(gè)理想的篩選試驗，小兒中由于Hp感染比成人少。陽(yáng)性發(fā)現較成人更有助于診斷，文獻報道小兒中IgG抗體含量與細菌的多少或胃炎組織學(xué)嚴重程度之間有一定相關(guān)性。但血清學(xué)不能作為單一的診斷試驗用。且因Hp根除后抗體下降緩慢，故也不能用于抗菌治療后的即刻隨訪(fǎng)。
血Hp免疫印跡法：Hp-IgG抗體、cagA、vacA蛋白抗體，可用于區分感染的菌株的類(lèi)型，但價(jià)格昂貴。
Hp診斷檢測方法的比較(表1)。
常規做胸片X線(xiàn)檢查和B超檢查,除外某些慢性疾病如結核、肝炎。