微生物感染性角膜炎在世界范圍內仍是致盲的重要原因，尤其是真菌感染、棘阿米巴感染所致的巨大角膜潰瘍，由于組織破壞嚴重，更是為及時(shí)的診治帶來(lái)巨大挑戰。雖然借助微生物學(xué)檢查可以提高診斷的準確性，但畢竟不論微生物涂片還是培養都需要一定時(shí)間，且由于此類(lèi)患者角膜潰瘍累及層次較深，臨床上有時(shí)也很難取到足夠的角膜組織。活體共聚焦顯微鏡（IVCM）的出現為角膜組織的觀(guān)察和病原診斷提供了便利，可以直接觀(guān)察患者角膜病變情況，發(fā)現致病微生物，從而第一時(shí)間給予診斷和治療（圖1）。那么它與傳統的病原診斷“金標準”相比成績(jì)如何呢？

IVCM下典型角膜潰瘍圖像：A角膜潰瘍中心大量重疊的鐮刀菌屬菌絲B角膜潰瘍邊緣相對分散的真菌菌絲C棘阿米巴原蟲(chóng)包囊呈鏈狀或團塊狀分布

近期一項前瞻性雙盲對照研究探討了IVCM在真菌性和棘阿米巴角膜潰瘍診斷中的價(jià)值。研究共納入239例感染性角膜炎患者，行全面眼科檢查，再先后行IVCM檢查及角膜刮片微生物涂片及培養。微生物涂片及培養檢查者及4位IVCM閱片者均不知患者相關(guān)臨床資料，但有1位IVCM閱片者知曉患者全部病歷情況。最后比較IVCM與病原學(xué)診斷的敏感性和特異性。微生物涂片及培養發(fā)現真菌感染176例（74%），棘阿米巴感染17例（7%），細菌感染19例（8%），IVCM在診斷真菌性角膜炎的敏感度和特異度分別為85.7%和81.4%，其中可以獲知患者臨床情況的IVCM閱片者診斷敏感度可以高達89.8%；病程較短的患者（＜4d）中，IVCM診斷敏感度可以達到95%，隨著(zhù)病程延長(cháng)（＞10d），IVCM敏感度則降至72%。IVCM在發(fā)現阿米巴原蟲(chóng)方面，敏感性和特異性分別為88.2%和98.2%。對于IVCM假陽(yáng)性和假陰性的病例，研究者也著(zhù)重進(jìn)行了分析，例如11例涂片、培養均陰性的患者，IVCM檢查中卻發(fā)現了典型的真菌菌絲或阿米巴原蟲(chóng)（圖2），結合其臨床表現，研究者認為11例患者確存在相關(guān)病原的感染，可能由于角膜潰瘍已深達后1/3角膜組織，刮片取得組織較少而導致了微生物涂片及培養檢查均為陰性。而9例IVCM“假陰性”的患者普遍存在角膜組織水腫嚴重不透明或IVCM配合欠佳取得圖片較少的情況。因此研究者認為如能很好的進(jìn)行IVCM檢查，并結合相關(guān)臨床資料，其對角膜潰瘍病原診斷還是有極大幫助的。

微生物涂片、培養均為陰性但IVCM有陽(yáng)性發(fā)現的6例，A-E為真菌感染，F為棘阿米巴原蟲(chóng)感染

總之IVCM具有無(wú)創(chuàng )、快捷的優(yōu)勢，結合臨床具體情況，可以為真菌性、阿米巴感染角膜潰瘍的及時(shí)診斷和治療提供較大幫助。

活體共聚焦顯微鏡（IVCM）的工作原理是聚光鏡和物鏡焦點(diǎn)相同，可用于眼表各層組織的實(shí)時(shí)、無(wú)創(chuàng )檢測和動(dòng)態(tài)觀(guān)察。適用于多種角膜疾病的診斷和隨訪(fǎng)，包括感染性角膜疾病的診斷、各種角膜變性和營(yíng)養不良的形態(tài)學(xué)檢測等。自應用于臨床以來(lái)，被認為是眼表疾病研究最有價(jià)值的工具之一，尤其在真菌、阿米巴感染性角膜潰瘍的診斷和隨訪(fǎng)過(guò)程中，由于其圖像的特異性，不僅具有較高的診斷敏感性和特異性，而且無(wú)需角膜刮片和組織活檢，其可重復性檢測的特點(diǎn)在中重度角膜潰瘍患者和治療隨訪(fǎng)的診治中也顯示出其顯著(zhù)的優(yōu)勢。在經(jīng)過(guò)治療，角膜刮片或者裂隙燈檢查陰性的患者，IVCM仍可顯示病原體的存在，為臨床診治提供更多信息。