如今人們知道T細胞能夠識別并殺死腫瘤細胞，利用抗腫瘤活性為目的的治療方法被稱(chēng)為癌癥免疫療法。可通過(guò)使用克隆特異性T細胞受體（TCR）來(lái)掃描出現在組織相容性復合體（MHC）上的小肽片段，從而實(shí)現T細胞檢測異常腫瘤細胞。

許多人類(lèi)腫瘤存在大量的DNA突變，過(guò)去研究證明了突變基因編碼的“腫瘤抗原”是當前癌癥免疫療法發(fā)展的一個(gè)主要推動(dòng)力。由于新抗原的表達完全受限于腫瘤，發(fā)展增強腫瘤抗原特異性T細胞反應的療法最為受歡迎。然而，由于腫瘤患者（如黑色素瘤患者和肺癌患者）中的絕大多數突變在預見(jiàn)頻率上不具共享性，這導致事實(shí)變得更加復雜，因此腫瘤對免疫系統出現排異大部分歸因為私有抗原。如何開(kāi)發(fā)新抗原特異自體T細胞產(chǎn)品？科學(xué)家需要新鮮的腫瘤材料，然而這種壯舉難以在多種腫瘤中實(shí)現。

Nature子刊：免疫療法中的液態(tài)活檢

在新研究中，研究人員表明在個(gè)體癌癥患者的血液中發(fā)現同樣的T細胞PD-1表達。通過(guò)這種方法，循環(huán)CD8+T細胞表達的PD-1不僅為腫瘤中T細胞抗腫瘤活性打開(kāi)了窗口，還可作為腫瘤免疫療法中分離腫瘤反應CD8+T細胞的標志物。綠色細胞代表表達PD-1（對腫瘤細胞突變抗原做應答）的腫瘤抗原特異性CD8+T細胞，藍細胞代表表達特異性抗原而非腫瘤抗原的CD8+T細胞。

近日，發(fā)表于《Nature Medicine》上的研究展現了一種獲取腫瘤抗原特異性T細胞的捷徑，研究人員表示可以從黑色素瘤患者的循環(huán)血液中將其準確分離。這樣一來(lái)，他們?yōu)榫哂袕V闊應用潛力的癌癥自體免疫細胞治療新思路打下了基礎。

在本次研究中，研究人員用以確定外周血腫瘤反應T細胞群的方法聚焦于毒性CD8+ T細胞群。早前該研究團隊曾表明黑色素瘤患者中對腫瘤侵潤性T細胞反應的腫瘤富含表達PD-1的T細胞。為了測試外周血T細胞是否也有這樣的效應，研究人員使用流式細胞儀分離癌癥患者血液中表達或不表達PD-1的CD8+T細胞群，同時(shí)研究人員通過(guò)深度測序以確定相應患者的腫瘤特異性基因突變，將突變的基因片段在自體樹(shù)突狀細胞中進(jìn)行人為表達。

通過(guò)對抗原呈遞細胞和從患者血液中分離出來(lái)的不同CD8+T細胞群進(jìn)行共培養，研究人員發(fā)現血液中T細胞PD-1的表達（PD-1–expressing T cells），而不是（或很少）缺乏PD-1的T細胞對個(gè)體腫瘤中的抗原具有反應性。有趣的是，作者還表明血細胞室中表達PD-1的T細胞的腫瘤抗原特異性與腫瘤本身PD-1表達T細胞非常相似。

本次研究共有四個(gè)黑色素瘤患者參與，研究人員從三個(gè)患者的血液中分離出突變特異的T細胞，該結果如何應用至黑色素瘤的一般人群還有待觀(guān)察，因此更不用說(shuō)用于其他類(lèi)型的癌癥。然而，通過(guò)展示PD-1+T細胞子集中的腫瘤反應，該研究引發(fā)了很多值得深思的問(wèn)題。

首先，如何將這些觀(guān)察轉化到T淋巴細胞子集中：CD4+幫助T細胞？這種T細胞亞型有助于啟動(dòng)或保持T細胞應答的持久性，包括針對腫瘤的T細胞。此外，與CD8+對應，CD4+輔助T細胞可識別伴隨DNA突變而出現的腫瘤抗原，也曾有病例報告表明了這些細胞的潛在臨床效用性。因此，了解能否使用PD-1或其他的標記物來(lái)識別血液腔中的腫瘤特異CD4+ T細胞顯得非常重要。

其次，作者觀(guān)察到了血液腔中腫瘤特異性CD8+T細胞在其他標記物或抗體缺乏時(shí)表達PD-1，那么問(wèn)題來(lái)了，在這種情況下是什么使PD-1特殊？可以想象，循環(huán)T細胞PD-1的表達揭示了這些細胞曾經(jīng)遇到的一些激活信號，這也是將來(lái)的研究熱點(diǎn)。