3D培養牙周膜干細胞生物學(xué)特性的初步研究
摘要:研究指出,3D懸滴培養法是一種理想的PDLSCs培養方法。該文發(fā)表在2014年第05期《牙體牙髓牙周病學(xué)雜志》上。
近日,南方醫科大學(xué)南方醫院研究人員發(fā)表論文,旨在研究懸滴法3D培養和2D貼壁培養的牙周膜干細胞(PDLSCs)生物學(xué)特性的差異。研究指出,3D懸滴培養法是一種理想的PDLSCs培養方法。該文發(fā)表在2014年第05期《牙體牙髓牙周病學(xué)雜志》上。
改良酶消化組織塊法分離培養PDLSCs,分別行2D貼壁培養及3D培養(3D培養按不同細胞接種數分為2.5×104,5×104及1×1053組),培養96h后分別用Live/Dead染色法分析細胞活性;流式細胞術(shù)檢測干細胞表面標記物;然后對2D、3D培養的PDLSCs進(jìn)行礦化誘導,茜素紅染色及熒光定量PCR檢測礦化結節形成情況以及礦化相關(guān)基因ALP和OPNmRNA的表達水平。
3D培養的PDLSCs可形成致密的細胞聚合物,2.5×104組PDLSCs細胞聚合物中心未見(jiàn)壞死現象,5×104組和1×105組則有較為明顯壞死現象;3D和2D培養的PDLSCs間充質(zhì)干細胞表面標記物的陽(yáng)性表達率均無(wú)顯著(zhù)差異(P>0.05);茜素紅染色和熒光實(shí)時(shí)定量PCR結果顯示,3D培養的PDLSCs形成礦化結節的數量及其礦化相關(guān)基因ALPOPNmRNA的表達水平均顯著(zhù)高于2D培養的細胞(P<0.05)。