敏感性肌膚作為令人困擾的皮膚問(wèn)題已經(jīng)成為影響生活質(zhì)量的關(guān)鍵因素之一。敏感肌膚通常伴隨末梢神經(jīng)感受器的過(guò)度反應，尤其是由于TRPV1過(guò)度活躍所導致的灼燒、刺痛的等不良感覺(jué)。之前的研究顯示，末梢神經(jīng)感受器的TRPV1受體對于辣椒素的敏感性與自述的敏感肌膚現象具有明確的相關(guān)性。通過(guò)篩選我們確認4-叔丁基環(huán)己烷作為特定的TRPV1拮抗劑，并經(jīng)人體測試證明可有效阻斷由辣椒素引起的灼燒感或刺痛感，從而有效舒緩肌膚不適感。

　　體外測試Invitro：HEK293細胞能夠穩定地表達重組人類(lèi)TRPV1受體，可用來(lái)篩選潛在的TRPV1拮抗劑。由于辣椒素能激活TRPV1，誘導FLEX系統中鈣離子濃度的變化(鈣離子的連續變化)，并對鈣離子濃度的變化進(jìn)行測定。

　　體內測試Invivo：30位志愿者對辣椒素的敏感性進(jìn)行研究測試，使用兩種不同的軟膏涂于面部，一種含有辣椒素，另一種含有辣椒素和0.4％的4-叔丁基環(huán)己烷。在隨后的3分鐘評價(jià)其刺痛感和灼燒感，按以下幾個(gè)等級評分：0(沒(méi)有感覺(jué))——4(強烈的感覺(jué))；使用Wilcoxon平行對照方法進(jìn)行統計分析。

　　4-叔丁基環(huán)己烷可以抑制由于辣椒素誘導的通過(guò)TRPV1的鈣離子流量，在人體測試中，其IC50為34μM。刺痛的感覺(jué)評分顯著(zhù)降低，由1.6降至0.6(p＜0.001)，灼燒感的感覺(jué)評分也明顯降低，從2.8降至0.8(p＜0.0001)。

　　基于這些結果，我們確認4-叔丁基環(huán)己烷是有效的TRPV1拮抗劑，無(wú)論體外實(shí)驗還是活體實(shí)驗都得到了很好的證明。

　　此外，該活性物能有效舒緩敏感肌膚，從而抑制刺痛感和灼燒感。

　　敏感肌膚作為常見(jiàn)的困擾肌膚狀態(tài)普遍存在，且很大程度上影響了生活的質(zhì)量。超過(guò)50％的消費者自述為敏感性肌膚。據報道，敏感性肌膚在消費者所占比例，在歐洲和美國人群中占50％，在日本和中國人群中占36％。

　　敏感性肌膚的臨床表現通常伴隨著(zhù)灼燒、刺痛和瘙癢的面部不適感。由于外界的因素引起了肌膚的敏感，如氣流或快速變化的溫度，抑或使用了化學(xué)或天然的混合物。敏感肌膚是一種神經(jīng)現象，與超敏性或特異性皮炎無(wú)關(guān)。試驗結果提示，敏感肌膚與表皮敏感神經(jīng)的生理機制有關(guān)，臨床測試研究中，敏感肌膚的受試者使用了辣椒素這一對皮膚具有高反應性的原料。

　　辣椒素是瞬時(shí)感受器電位離子通道香蘭素亞家族(TRPV1，辣椒素受體，VR1)的天然拮抗劑。TRPV1用于表達中樞和末梢神經(jīng)。不同類(lèi)型的刺激物對受體進(jìn)行激活，如低pH值(＜5.9)，損害性高溫(＞42℃)，大麻／內源性大麻素，白三烯B4和外源性辣椒素。

　　因此，如：使用辣椒素后，TRPV1被激活，引起灼痛感或灼燒感。此外，TRPV1受體會(huì )被緩激肽和前列腺素、以及神經(jīng)生長(cháng)因子所激活，并降低響應閾值，使疼痛及癢感更易發(fā)生。由于TRPV1的感覺(jué)功能(灼燒感，瘙癢癥)，可以推測TRPV1與敏感肌膚相關(guān)。

　　TRPV1在很多非神經(jīng)細胞上表達，其中包括角化細胞，分化的皮脂細胞，毛囊細胞，汗腺導管，肥大細胞，3T3-L1-前脂肪細胞和成纖維細胞，辣椒素或高溫激活在角化細胞中的TRPV1，促進(jìn)炎癥因子前列腺素PGE2和白介素IL-8的釋放，并誘導釋放MMP-1。此外，辣椒素可作為毛發(fā)生長(cháng)的抑制劑。最近，有研究報道在溫度34℃或42℃時(shí)，屏障修復的時(shí)間會(huì )顯著(zhù)延緩。辣椒素也會(huì )延遲屏障修復，而TRPV1拮抗劑阻斷了這種延遲。因此提示TRPV1也參與了表皮屏障的動(dòng)態(tài)平衡。

　　由于TRPV1廣泛分布在皮膚細胞中，且與刺痛感、皮膚炎癥、皮膚老化、甚至頭發(fā)的生長(cháng)調節等功能具有相關(guān)性，使得TRPV1在美容行業(yè)成為被高度關(guān)注的焦點(diǎn)。因此，我們專(zhuān)門(mén)開(kāi)發(fā)了TRPV1拮抗劑引入化妝品領(lǐng)域。

　　實(shí)驗：原料和方法

　　Invitro體外測試：利用可以穩定表達人體TRPV1的HEK293細胞系，進(jìn)行篩選測試。測試有效范圍在0.5-50μM的潛在的拮抗劑。被測試的化合物不但平行加入30nM的辣椒素，且在加入辣椒素之前10分鐘加入。以藥理TRPV1拮抗劑釕紅(1μM)作為陽(yáng)性對照。通過(guò)對TRPV1活化誘導的鈣流量使用鈣敏感熒光染料fluo-4(494/516nm(ex/em))進(jìn)行測定。

　　結果和討論

　　通過(guò)對17,000種各種不同的化合物進(jìn)行篩選出170個(gè)候選化合物并進(jìn)行驗證，篩選出5種化合物進(jìn)行進(jìn)一步的研究，其中4種為天然化合物的合成衍生物，一種為芳香化合物4-叔丁基環(huán)己醇。

　　臨床測試

　　在人體實(shí)驗中，我們分別選出20和30名的受試者以驗證對辣椒素的敏感性。使用兩種不同的乳劑涂于鼻唇溝，其中一種含有辣椒素，另一種含有辣椒素和1％的4-叔丁基環(huán)己烷，臨床研究1％(見(jiàn)圖2)或0.4％的4-叔丁基環(huán)己烷，臨床研究2(圖3)。

　　3分鐘后評價(jià)刺痛感和灼燒感，按0(沒(méi)有感知)4分(強烈的感覺(jué))進(jìn)行打分；使用Wilcoxon配對測試方法進(jìn)行統計分析。

　　結論

　　基于上述結果，可以確認4-叔丁基環(huán)己烷是有效的TRPV1拮抗劑，并經(jīng)體外和人體試驗證實(shí)。根據不同的劑量，當使用1％4-叔丁基環(huán)己烷時(shí)，與空白對照相比，可有效降低刺痛感和灼燒感4.5倍；當使用0.4％4-叔丁基環(huán)己烷時(shí)，與空白對照相比，可有效降低刺痛感和灼燒感2倍之多(人體測試invivo)，從而表明由辣椒索引起的刺痛感和灼燒感被4-叔丁基環(huán)己烷有效降低到了感覺(jué)閾值水平之下。

　　因此，4-叔丁基環(huán)己烷屬于用于敏感肌膚的劃時(shí)代的活性成分。它對肌膚的調節作用有助于提高肌膚的耐受閾值。同時(shí)，它可作為“敏感調節器”，在細胞膜中降低鈣離子流量，使肌膚恢復正常健康的狀態(tài)。