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都是蛋白惹的禍

2018-04-23 來(lái)源:檢驗科  標簽: 掌上醫生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護膚
摘要:單克隆免疫球蛋白的存在,并不一定總是會(huì )對某一項目造成干擾。而究竟會(huì )不會(huì )對某個(gè)項目產(chǎn)生干擾,產(chǎn)生多大程度的干擾,這些都是很難事先準確預判的。

 我們地球人都知道,蛋白質(zhì)是生命的基礎。對體弱有病的人,醫生常常囑咐要多補充蛋白質(zhì)。那么,人體內的蛋白質(zhì),就是多多益善的嗎?

 
非也!今兒我們就來(lái)說(shuō)道說(shuō)道。
 
想必大家都聽(tīng)過(guò)MM吧。妹妹?美眉?
 
What?你想什么呢!我說(shuō)的醫學(xué)里的MM——多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma)啊。這個(gè)MM最為顯著(zhù)的一個(gè)特征是,生化檢驗結果中,總蛋白和球蛋白會(huì )異常增高。
 
MM的患者會(huì )出現骨痛、腎功能不全、反復感染、貧血和出血等一系列問(wèn)題。[1]因此,人體內的蛋白質(zhì),并非是越多越好啊。
 
MM與華氏巨球蛋白血癥等都屬于漿細胞病。它們的共同特征是,骨髓內漿細胞異常增生,導致單克隆免疫球蛋白[或者被稱(chēng)為副蛋白(paraprotein)]過(guò)度生成。
 
除漿細胞病外,在慢性淋巴細胞白血病、淋巴瘤、結腸癌、肝硬化、自身免疫性疾病,以及寄生蟲(chóng)病等中,都可能產(chǎn)生單克隆免疫球蛋白。[1]
 
過(guò)量的單克隆免疫球蛋白,不僅會(huì )對患者的腎臟等造成損害。他們的存在,還會(huì )對很多檢驗項目造成干擾,得出假性的結果。
 
如果不加以識別和糾正,這些假性的結果會(huì )干擾對患者的診治。因此,這類(lèi)MM可一點(diǎn)都不美啊。
 
下面我們就來(lái)見(jiàn)識一下,這些單克隆免疫球蛋白,在日常檢驗工作中,到底有多可惡。

生化檢驗
 
現在絕大多數生化項目的檢測,都是利用特定試劑與血清,在水溶液中進(jìn)行反應。通過(guò)監測反應前后吸光度的變化,來(lái)計算待測物質(zhì)的濃度。
 
而MM等患者血清中的單克隆免疫球蛋白,就可能會(huì )在這些反應溶液中沉淀出來(lái)。使反應的吸光度發(fā)生異常改變,從而得出假性結果。
 
那么如何識別這類(lèi)假性結果呢?有的人會(huì )說(shuō),結合臨床呀。符合臨床的結果,就是真的。不符合臨床的,就是有干擾的。
 
但這往往是不現實(shí)和不具有可操作性的。比如,在MM的患者中,常會(huì )出現假性高磷血癥。[2]這該如何鑒別呢?
 
高磷血癥缺乏特異性的臨床表現,同時(shí)檢驗者也難以掌握患者全面的臨床信息。因此,想結合臨床來(lái)判斷,是不可行的。
 
那我們檢驗師傅,就只能坐以待斃,發(fā)出這樣模棱兩可的結果嗎?
 
當然不會(huì )啦!這時(shí)就要請我們的法寶出場(chǎng)了。前面說(shuō)了,MM等患者的生化結果出現異常,主要是單克隆免疫球蛋白沉淀,導致反應吸光度異常變化。
 
而在生化儀上,我們可以查看每個(gè)項目的反應曲線(xiàn)——它就如同一面照妖鏡,一旦這些異常蛋白在反應中搗亂,那它們的斑斑劣跡,就難逃我們檢驗人員的法眼。
 
下面就是一些反應曲線(xiàn)的例子。先來(lái)看一看剛提到的假性高磷血癥的。從圖1中可以看到,正常血清磷的反應曲線(xiàn)(A),是由兩段幾乎水平的直線(xiàn)組成。
 
而受到單克隆免疫球蛋白干擾的反應曲線(xiàn)(B、C和D),則有不同程度的異常上升或下降。并且,這三條異常曲線(xiàn)起始階段的吸光度,就顯著(zhù)大于正常曲線(xiàn)的。
 
因此,當遇到這類(lèi)可疑的結果時(shí),通過(guò)觀(guān)察、對比正常與異常的反應曲線(xiàn),就很容易明確結果是否有問(wèn)題。
 
假性高磷血癥是MM等患者中較為常見(jiàn)的一種結果。但有些諷刺的是,在一些MM患者中,卻會(huì )出現假性低磷血癥,這同樣需要注意和鑒別。[3]
 
除了以上的幾個(gè)項目外,單克隆免疫球蛋白還可能導致總膽紅素假性偏高、肌酐假性降低、假性低血糖、假性高鈣血癥等。[5]
 
那這些項目為何容易受到干擾呢?以最常受到干擾的磷和膽紅素為例,它們的檢測都是在強酸性、重金屬鹽存在下進(jìn)行的,導致單克隆免疫球蛋白容易沉淀出來(lái)。這與鹵水點(diǎn)豆腐是一個(gè)道理。
 
同時(shí),在磷的檢測過(guò)程中會(huì )有鉬酸生成,它曾與鎢酸一樣,被用作沉淀劑來(lái)獲得去蛋白濾液(老一輩的檢驗人會(huì )比較熟悉這一點(diǎn))。[6]因此,磷成為最容易受單克隆免疫球蛋白干擾的項目,也在情理之中了。
 
而像各種酶法項目,通常是在較為溫和、接近生理pH值的條件下反應的。所以,這些項目很少受到干擾。
 
不過(guò),遇到這類(lèi)假性結果,也并不總是壞事。因為此類(lèi)結果反過(guò)來(lái)也提示,患者很可能罹患MM等疾病。尤其是當臨床診斷還不明確時(shí),就更具價(jià)值了。這也算得上“因禍得福”了。
 
當我們鑒別出受干擾的項目后,下一步就是考慮怎樣才能獲得正確的結果了。

消除單克隆免疫球蛋白對生化反應的干擾,有以下的五種解決之道:
 
(1)稀釋標本重測,通過(guò)稀釋可以降低或消除干擾。[7]但是稀釋倍數過(guò)大,會(huì )使結果處于最低檢測限以下,無(wú)法得到正確的結果。而稀釋倍數過(guò)小,則又不能抵消干擾。因此,可能需要一些試驗,才能找到最佳的稀釋比。
 
(2)換用不同廠(chǎng)家的試劑進(jìn)行檢測。不同廠(chǎng)商的生化試劑,采用的檢測原理可能不同。
 
而即便是采用相同檢測原理的試劑盒,其中的各種組分也存在差異。這就導致對同一項目,可能A廠(chǎng)家的試劑會(huì )受到干擾,而B(niǎo)廠(chǎng)家的則不會(huì )。
 
(3)采用干化學(xué)法檢測。因為干化學(xué)法中使用的干片的表層,可以截留大分子物質(zhì)。因此,干化學(xué)法完全不受單克隆免疫球蛋白的干擾。
 
(4)對存在干擾的血清,加入聚乙二醇6000溶液,離心使單克隆免疫球蛋白沉淀后。取上清液檢測,可以獲得可靠的結果。[8]
 
(5)對于受到干擾的兩點(diǎn)終點(diǎn)法項目,可以考慮忽略第一檢測點(diǎn)的吸光度。也就是把該項目近似為一點(diǎn)終點(diǎn)法,只取第二檢測點(diǎn)的吸光度(A)。
 
再根據下列公式:濃度=(A-空白吸光度)×校準因子K,手動(dòng)計算結果。[9]當然,這種方法是否完全可行,還需要更多的驗證。
 
此外,大量單克隆免疫球蛋白的存在,還會(huì )使血清中的水含量降低,發(fā)生“電解質(zhì)排斥效應”。從而在利用間接離子選擇性電極法檢測時(shí),出現假性低鈉血癥等結果。[10]

免疫檢測
 
看到這里,做免疫檢測的小伙伴們,多半在偷著(zhù)樂(lè )了,心里想:生化果然low啊,不光脂血、溶血和黃疸等會(huì )干擾生化反應。現在又殺出個(gè)單克隆免疫球蛋白,還是我們大免疫靠譜啊。
 
且慢,免疫檢測也是不能幸免的。據報道,單克隆免疫球蛋白的存在,使一名患者的TSH出現了假性低值。[11]
 
而且,與生化檢測不同的是,發(fā)光免疫檢測并無(wú)類(lèi)似反應曲線(xiàn)的利器。因此,一旦出現此類(lèi)假性結果,將很難及時(shí)發(fā)現。
 
而解決辦法只有結合其他相關(guān)結果和臨床信息進(jìn)行綜合判斷。對可疑的結果進(jìn)行系列稀釋?zhuān)^(guān)察結果是否呈線(xiàn)性。或者用不同的檢測體系復查驗證。
 
此外,單克隆免疫球蛋白的存在,也可能使血清的粘度增大。如果加樣系統不是十分完美的話(huà),就會(huì )使生化儀和化學(xué)發(fā)光儀等出現加樣量不足,而導致錯誤的低值結果。
 
過(guò)量單克隆免疫球蛋白的存在,還會(huì )在免疫球蛋白定量檢測中,出現前帶效應(鉤狀效應),導致結果出現反常的低值。[7]

血常規
 
單克隆免疫球蛋白可導致一些血液分析儀測出的血紅蛋白濃度,出現假性偏高。這種情況下,反常偏高的MCH和MCHC是首要的線(xiàn)索。[12]
 
而糾正的方法有兩種,一種是離心后,檢測血漿層的“血紅蛋白”濃度,之后通過(guò)計算得到修正后的結果。而另一種是用等量鹽水置換血漿后,再行檢測。
 
MM等患者還可能產(chǎn)生冷球蛋白,它會(huì )使阻抗法的血小板、白細胞等結果出現假性高值。[13]此種情況下,適當的溫浴可以解決。

輸血學(xué)檢測
 
MM患者由于單克隆免疫球蛋白增多,導致正常的免疫球蛋白合成不足,血型抗體含量減少。這會(huì )導致反定型中出現凝集較弱,發(fā)生正反定型不合的情況。
 
同時(shí)MM患者的紅細胞常呈緡錢(qián)狀聚集,其血清中也可能存在一些冷抗體,這些都可能干擾血型鑒定和交叉配血。[14]

結語(yǔ)
 
最后需要強調的是,單克隆免疫球蛋白的存在,并不一定總是會(huì )對某一項目造成干擾。而究竟會(huì )不會(huì )對某個(gè)項目產(chǎn)生干擾,產(chǎn)生多大程度的干擾,這些都是很難事先準確預判的。[15]
 
眾所周知,生活中很少有完美的事物。不幸的是,在臨床檢驗中也是同樣的情景。我們并沒(méi)有十全十美,不受任何干擾的檢測項目。這就注定了我們可能隨時(shí)會(huì )遭遇到各種假性的結果。
 
但是,只要我們具備一雙法眼和慧眼;以及最重要的是,擁有一顆仁心,善待每一份標本和每一份結果。那么,我們一定能在不完美中達到完美。
 
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