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布魯斯氏菌病

布魯斯氏菌病 的檢查:

異型淋巴細胞 間接免疫熒光試驗 補體結合試驗

 1.外周血象 白細胞計數正常或偏低,淋巴細胞相對或絕對增加,有時(shí)可出現少數異型淋巴細胞,血沉在急性期增速,慢性期則正常或偏高,持續增速提示有活動(dòng)性。

2.病原體分離 可從血液,骨髓,腦脊液,尿液,膿液等進(jìn)行分離,牛型布魯菌初分離時(shí)不易生長(cháng),需有適當的二氧化碳環(huán)境,因布魯菌生長(cháng)較慢,故各種培養需經(jīng)孵育2~4周后仍無(wú)細菌生長(cháng),才能判為陰性,但有人報告,如采用BACTEC9240血培養系統,則93%(90/97)可在5天內或97.6%(41/42)可在2~6天內檢出,最近的報告也證實(shí)了這一點(diǎn):血培養均可在7天內,骨髓培養均在4天內獲得陽(yáng)性結果,一般認為血培養陽(yáng)性率急性期高,慢性期低,骨髓培養的陽(yáng)性率較血培養高,必要時(shí)可將標本接種豚鼠以分離布魯菌,有人建議,先將標本,特別是慢性布氏菌病的血液注入雞蛋的卵黃中,37℃培養5天后,再將卵黃液轉種到瓊脂斜面上,37℃ 2~3天后觀(guān)察,認為可提高陽(yáng)性率。
3.免疫學(xué)檢查
(1)血清凝集試驗:方法很多,常用者有試管法和平板法,前者較靈敏,操作也較簡(jiǎn)單,特異性也較好,故一般實(shí)驗室常用;后者操作更簡(jiǎn)單,靈敏性也高,但可有假陽(yáng)性,故適用于篩查,平板法也有很多種,其中以虎紅緩沖液玻片凝集試驗(RBPT)效果最佳,凝集試驗于病程第1周即可出現,第2~3周常呈強陽(yáng)性,試管法1∶100以上有意義,病程中效價(jià)有4倍以上升高者意義更大,但接種過(guò)霍亂菌苗,兔熱病菌苗,布魯菌菌苗或做過(guò)布魯菌素皮內試驗者均可使凝集效價(jià)增高,應當注意,另外凝集反應可有前帶現象(低稀釋度時(shí)陰性,而高稀釋度時(shí)反陽(yáng)性)故稀釋度至少應在1∶100以上,發(fā)生前帶現象的原因,有人認為是由于存在IgA抗體,有人認為與:IgA,IgG,IgM的比例有關(guān),當以IgA抗體為主時(shí)就可出現前帶現象,凝集反應在急性期時(shí)陽(yáng)性率很高,可達80%~90%,慢性期則較低,僅30%左右。
(2)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA):1∶320為陽(yáng)性,靈敏性比凝集實(shí)驗還高,特異性也很好,且可分別測定IgM,IgG,IgA抗體,其中IgM抗體出現較早,約于感染后1個(gè)月達高峰,然后開(kāi)始下降,IgG抗體產(chǎn)生較晚,至6個(gè)月達高峰,10個(gè)月后開(kāi)始下降,IgA抗體的消長(cháng)規律與IgG相似,且不易被巰基化合物破壞,分別測定不同抗體有助于復發(fā)的判斷,復發(fā)時(shí)IgG抗體重新升高,而IgM,IgA抗體常繼續下降,本法還可分別測定抗胞質(zhì)(CP)抗體及抗LSP抗體,前者特異性較好,但出現較晚,且早期抗菌治療可影響其出現,后者出現較早,且不受抗菌藥物的影響,但特異性稍差,故如兩者同時(shí)檢測,效果最好。
(3)補體結合試驗:1∶16為陽(yáng)性,急性期及慢性期的陽(yáng)性率均較高,特異性也很強,但陽(yáng)性出現時(shí)間較晚,病程第3周才開(kāi)始陽(yáng)性,且操作較為復雜,故僅用于診斷困難者,特別是慢性患者。
(4)抗入球蛋白試驗:1∶160( )為陽(yáng)性,用于測定不完全抗體,陽(yáng)性出現較晚,消失也較慢,比凝集試驗及補體結合試驗更靈敏,急性期及慢性期陽(yáng)性率均較高,特異性也較強,但操作較復雜,故僅用于診斷困難的病例,特別是慢性患者。
(5)其他血清學(xué)試驗:被動(dòng)血凝試驗,瓊脂擴散試驗,間接免疫熒光試驗,免疫電泳以及斑點(diǎn)免疫法(應用銀標記的布菌特異性抗原)等均可應用,有人應用2-巰基乙醇試驗來(lái)鑒別自然感染和菌苗免疫,但尚待研究。
(6)皮內試驗為遲發(fā)性超敏反應,發(fā)病后2~3周開(kāi)始出現陽(yáng)性,痊愈后仍能持續數年至20年,故陽(yáng)性時(shí)不能鑒別是現癥患者還是既往感染,一般僅用于流行病學(xué)調查,但陰性時(shí)則不支持本病的診斷。
4.分子生物學(xué)檢查 近年來(lái)有人應用能擴增編碼Mr為31×103布魯菌抗原的223bp基因片段的引物進(jìn)行PCR法以診斷布病,認為特異性與靈敏性均很好,除Ochrobactrum spp外,其他在血清學(xué)和種系發(fā)生學(xué)(phylogenesis)與布魯菌有關(guān)的其他微生物均陰性,有人對31例布氏菌病患者及45例健康人進(jìn)行此種檢測,結果特異性100%,陽(yáng)性率97%,而且發(fā)現血清的陽(yáng)性率高于全血,最近又有人應用套式(nest)PCR,認為可檢測到30個(gè)細菌,且無(wú)交叉反應。
組織病理可在網(wǎng)狀內皮系統如淋巴結,脾,肝產(chǎn)生上皮樣細胞肉芽腫,皮損的組織學(xué)變化常無(wú)特異性,血管周?chē)袕娏已装Y反應,血管內皮明顯增生,肉芽腫形成。

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