單純皰疹病毒肺炎 的檢查：

聚合酶鏈反應技術(shù) 痰培養+藥敏試驗 痰液常規檢查 痰液細胞學(xué)檢查 放射免疫分析 血常規 胸部平片

HSV病毒可從氣管支氣管分泌物、支氣管肺泡灌洗液、肺組織中獲得。采用纖維支氣管鏡收集標本應早期進(jìn)行。經(jīng)皮細針抽吸肺活檢和開(kāi)胸肺活檢無(wú)多大幫助。皮膚黏膜損害囊泡液體中病毒的最高分離率為80%～98%，當潰瘍結痂和愈合分離率則下降(<25%)。標本的收集和運送在分離病毒過(guò)程中相當重要。標本應盡快收集，因為在疾病進(jìn)展后分離到病毒的可能性減少。收集標本后及時(shí)接種，可能有較高的病毒分離率。必須注意運送和儲存標本的條件，在正式檢測前，標本不能放在-20℃的冰箱中冷凍;運送過(guò)程中標本可保存4℃ 48h。
HSV感染的實(shí)驗室診斷應從兩方面評價(jià)：首先，確定病人是否正在排放病毒，有無(wú)存在HSV現行感染以進(jìn)行積極的抗病毒治療。其次，在可疑患者病毒重新激活出現臨床癥狀前，確定病人血清抗體是否陽(yáng)性，以檢查過(guò)去是否感染HSV，以確定在骨髓移植、器官移植、誘導化療前有無(wú)必要進(jìn)行預防性抗病毒治療。
1.細胞培養 組織培養為最敏感和特異的診斷方法，亦可用于病毒的分型。在病毒高滴度的標本，24～48h內可獲得陽(yáng)性結果，接種后72h內在90%的培養基中可產(chǎn)生特征性的細胞病變效應;而在低滴度的標本，7天后方可看到特征性變化。然而，組織培養并不能始終確立病毒的存在，這是因為標本的收集和運送欠妥以及使用抗病毒藥可能出現假陰性。
2.檢測病毒
(1)Papanicolaou(Pap)或Tzank試驗：是快速、便宜的細胞診斷方法，先進(jìn)行病變部位的刮片細胞染色，能在20min內顯示細胞改變，即多核巨細胞形成、胞質(zhì)空泡樣變和包涵體。陽(yáng)性涂片結果可靠，但不能區分水痘-帶狀皰疹病毒(varicella-zoster virus，VZV)和HSV-1或HSV-2。陰性涂片亦不能排除皰疹病毒感染。在理想情況下，Tzanck涂片約50%陽(yáng)性，其敏感性和特異性均較低，且依靠檢測者經(jīng)驗;由于許多技術(shù)和實(shí)際原因，應用受限。
(2)單克隆抗體間接免疫熒光染色檢查：用于病灶刮片檢查，敏感度為78%～88%，假陽(yáng)性少見(jiàn)。直接電子顯微鏡檢查很誘人，因為可在2h內完成，但敏感性多變，特異性低。酶聯(lián)免疫吸附試驗用于單純皰疹病毒的檢查，敏感度可達95%，特異性高，但標本收集后如不立即檢查其敏感度下降。亦有采用放射免疫分析法檢查單純皰疹病毒。熒光素標記抗體試驗、間接免疫過(guò)氧化物酶試驗或使用單克隆抗體的酶免疫分析法等，這些方法價(jià)格低廉，快速，不需要細胞培養技術(shù)。新近產(chǎn)生的用單克隆抗體進(jìn)行直接熒光素標記抗體染色的離心技術(shù)快速敏感，但更常用于巨細胞病毒的診斷。使用免疫熒光直接檢測HSV抗原，特異性高但敏感性差，且依靠標本質(zhì)量。
酶免疫測定法(EIA)測HSV抗原，有培養放大技術(shù)和直接檢測技術(shù)，研究結果顯示：HSV EIA對各種來(lái)源的標本高度敏感(93.7%)，高度特異(96.6%);方法簡(jiǎn)單，重復性好，快速(4h)，標本受細菌污染時(shí)影響結果，已治愈或正在進(jìn)行抗病毒治療的病人結果不可靠。氣管支氣管標本和下呼吸道分泌物的病毒培養，陽(yáng)性結果通常需2～5天，但陰性結果需2周才能確定。
(3)DNA探針技術(shù)的應用：DNA探針有助于HSV感染的診斷。DNA探針在細胞形態(tài)學(xué)可疑時(shí)能確定診斷。幾種因素能混淆形態(tài)學(xué)診斷：
①HSV包涵體與巨細胞病毒(cytomegalovirus，CMV)和腺病毒(adenovirus)的包涵體相似。
②發(fā)生HSV和CMV雙重感染時(shí)。
③除了HSV其他呼吸道病毒也能產(chǎn)生多核細胞。原位雜交使特殊病毒基因組序列定位，它比傳統的確定方法簡(jiǎn)單快速。
(4)聚合酶鏈反應技術(shù)(PCR)：PCR對HSV病毒感染可提供結論性依據，即使在石蠟包埋組織只要有一致的病毒病理改變即可。每次檢查必須有陰性對照組織。盡管存在隱性感染的可能性，但對沒(méi)有病毒病理改變的對照組織，PCR檢查HSV仍為陰性。如進(jìn)行合適的對照，該方法快速(1天內完成)，準確特異，敏感性高，能對陳舊或復雜的標本進(jìn)行處理。PCR和HSV培養結果近似，PCR沒(méi)有Tzanck涂片和病毒培養的許多技術(shù)和實(shí)際限制，PCR在快速診斷可疑HSV病毒感染的免疫抑制病人顯示其優(yōu)越性。
3.血清學(xué)檢查 該方法的最大價(jià)值是證明病人已經(jīng)感染過(guò)HSV，血循環(huán)中的抗HSV抗體是存在反復感染可能的標志。抗體滴度增加4倍或更多提示HSV的近期感染。HSV抗體可通過(guò)許多方法檢測，包括補體結合試驗，微量中和試驗和酶免疫分析法。這些方法高度敏感和可靠，但血清學(xué)檢查不能區分內源性病毒感染和重新感染。血清學(xué)檢查結果無(wú)診斷意義，無(wú)助于快速診斷。另一問(wèn)題為HSV-1和HSV的交叉反應，故不能確定HSV急性感染的血清分型。僅僅在急性期血清中無(wú)HSV抗體時(shí)，血清學(xué)檢查可用于診斷HSV初次感染，在這種情況下，如果恢復期血清中抗體出現，可稱(chēng)為血清轉陽(yáng)現象(seroconversion)。HSV肺炎時(shí)抗體滴度不增高常提示預后較差，病毒容易廣泛播散。
4.病毒分型 常用3種方法為單純皰疹病毒分型。首先采用和標準的方法為限制性?xún)惹泻怂崦盖懈睿⒔?jīng)瓊脂凝膠電泳分離，HSV-1和HSV-2的DNA類(lèi)型不同，據此很容易鑒別HSV-1和HSV-2。第2種方法為用熒光素標記的特異性單克隆抗體進(jìn)行病毒的分型，該方法具有對切片和培養基進(jìn)行快速和直接檢測的優(yōu)點(diǎn)。第3種方法為使用溴乙烯去氧苷(5-bromovinyldeoxyuridine，BrdU)，該物質(zhì)在細胞培養基保持適當濃度僅可阻滯HSV-1復制。HSV血清分型對于流行病學(xué)很重要，臨床醫生很少需要這種信息，HSV生殖道感染和HSV腦炎例外。
對于非致命性HSV感染，可進(jìn)行病毒培養的實(shí)驗室檢查，因為這種感染常常臨床上即可鑒別，提取標本后數天內可獲得病毒確認。而對于致命性HSV感染，須進(jìn)行立即抗病毒治療，所以必須進(jìn)行快速準確的HSV感染的診斷。最好的方法為免疫熒光染色。嚴重HSV感染患者早期進(jìn)行抗病毒治療有較好的預后。雖然在確診之前可進(jìn)行抗病毒治療，但快速的陽(yáng)性檢查結果能促使醫生盡早開(kāi)始抗病毒治療。新生兒HSV嚴重感染患者可能僅有皮膚損害作為HSV感染的證據，快速診斷檢查尤為重要，如耽誤了診斷和治療，將很快發(fā)生其他部位的播散，預后將明顯惡化。在無(wú)癥狀的HSV感染病人，不能過(guò)分強調進(jìn)行HSV快速診斷試驗。
X線(xiàn)胸片與其他肺部感染較難鑒別。可顯示局限性、多發(fā)性或彌漫性間質(zhì)浸潤，早期可有典型的肺門(mén)或彌漫性間質(zhì)密度增加，支氣管壁增厚，隨著(zhù)病情進(jìn)展可見(jiàn)斑片狀肺泡填塞。單純皰疹病毒性氣管支氣管炎胸片可正常。