聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)概述

聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)診斷幽門螺旋桿菌是否存在僅需微量的DNA，而不需要活菌存在(這不同于其他幽門螺旋桿菌檢測(cè)方法)，它不僅可以檢測(cè)胃內(nèi)幽門螺旋桿菌，還可望檢出胃以外部位，如牙斑、糞便內(nèi)的幽門螺旋桿菌，還可用于流行病學(xué)調(diào)查，它的敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了其他方法，有利于確定細(xì)菌感染的來源及途徑，它是一種很有前途的幽門螺旋桿菌檢測(cè)方法。

• 檢查部位 腹部
• 科室 內(nèi)科
• 相關(guān)疾病 慢性胃炎 滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤 嚴(yán)重急性呼吸綜合征 百日咳 外陰痛 拉沙熱 庚型病毒性肝炎 亞急性硬化性全腦炎 膀胱結(jié)核 外陰佩吉特病 單純皰疹病毒肺炎 單純皰疹性葡萄膜炎 腦膜炎球菌性腦膜炎 結(jié)核性腦膜炎 老年人結(jié)核性腦膜炎 胃損傷 肝結(jié)核 真菌性角膜炎 阿米巴痢疾 衣原體感染癥
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• 相關(guān)癥狀

聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)正常值

• 測(cè)定Hp無有關(guān)毒力因子基因的mRNA(信使核糖核酸)得存在。 

聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)臨床意義

• 異常結(jié)果：測(cè)定Hp有關(guān)毒力因子基因的mRNA(信使核糖核酸)的存在。
  需要檢查人群：消化性潰瘍，慢性胃炎患者。 

聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)檢查方法

• 1材料：標(biāo)本采自經(jīng)胃鏡檢查確診的胃、十二指腸潰瘍、各類胃炎及潰瘍合并胃炎病例，在距幽門口5cm內(nèi)鉗取胃粘膜2份(每例檢查前2周停用抗HP藥物)，分別作PCR及病理切片檢查，檢測(cè)HP。
  2研究方法：PCR技術(shù)：采用廈門長(zhǎng)城生物工程有限公司生產(chǎn)的HPDNAPCR診斷試劑盒，DNA抽提采用水煮沸法，引物為尿素酶基因片段，其核著酸順序?yàn)椋阂?為5'-AAGCTTTTATTAGGGGTTT—3'，引物2為5'-TTATTACGCTTC—3'，擴(kuò)增產(chǎn)物為456bP，94℃預(yù)變性5分鐘，94℃30秒，55℃30秒，72℃1分鐘共32個(gè)循環(huán)，72℃延伸5分鐘，2%瓊脂糖凝膠電電泳20分鐘, BE染色在456bp出現(xiàn)條帶為陽性, 根據(jù)陽性帶亮度分別作、定量判斷。 

聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)注意事項(xiàng)

• 不適宜人群：
  1)凝血功能差者。
  2)胃血管瘤(質(zhì)軟)
  檢查前禁忌：
  1.檢查前一天避免吸煙，以免檢查時(shí)因咳嗽影響插管。
  2.要有成人親友陪伴，術(shù)前取下假牙。
  3.檢查前一天晚飯后不應(yīng)再吃東西，檢查當(dāng)天早晨不應(yīng)再喝水。
  檢查時(shí)禁忌：1.告知醫(yī)生您的既往病史及藥物過敏史。
  2.囑病人在操作中不要做過多的吞咽動(dòng)作，防止唾液吸入氣道及引起喉頭疼痛。
  3. 向病人說明胃鏡檢查的目的，鼓勵(lì)病人樹立信心，勿緊張，配合醫(yī)生順利完成檢查。抽取胃粘膜檢查即可。
  4.準(zhǔn)備好基因片段，保證電泳完成。