貓抓病
貓抓病 的檢查:
1.血常規 病程早期白細胞總數減少,淋巴結化膿時(shí)輕度升高,中性粒細胞增多,血沉加快。
2.病原體培養和分離 從患者血液、淋巴結膿液和原發(fā)皮膚損害處可分離培養出漢賽巴通體,則診斷肯定。但該病原體大多呈細胞壁缺陷型,培養條件要求較高,只有在含鮮血或巧克力培養基,在35℃二氧化碳孵箱中培養6周才可生長(cháng),再用Warthin-Starry銀浸染色法可見(jiàn)多形性革蘭陰性桿菌。因而不能作為早期診斷方法,在臨床應用上受到限制。
3.免疫學(xué)檢查
(1)皮膚試驗:貓抓病抗原目前尚未商品化,因此采用從淋巴結穿刺液經(jīng)加熱殺菌后作抗原對診斷有較肯定的價(jià)值。皮試方法:取抗原0.1ml前臂掌側皮內注射,48h出現直徑≥5mm的硬結者為陽(yáng)性,周?chē)?0~40mm水腫紅暈,此紅暈一般存在48h,硬結可持續5~6天或4周。皮膚試驗為遲發(fā)型變態(tài)反應,較靈敏與特異,其假陽(yáng)性約在5%。間隔4周反復2次尚陰性可除外貓抓病診斷。感染后皮膚試驗陽(yáng)性反應可保持10年以上。
(2)間接免疫熒光抗體試驗(IFA):用熒光素標記的抗原,測定患者血清中的漢賽巴通體特異性抗體,其效價(jià)≥1∶64為陽(yáng)性。據報道其陽(yáng)性率為88%,對照組僅3%。病程早期及4~6周以上兩份血清效價(jià)有4倍以上增長(cháng),對診斷也有意義。本試驗是一種簡(jiǎn)便、快速、靈敏及特異確診本病最易推廣應用的方法。
(3)酶聯(lián)免疫吸附試驗:檢測抗漢賽巴通體IgM抗體,敏感性強,特異性較好,有臨床診斷價(jià)值。ELISA~IgG抗體敏感性較低,不能作為實(shí)驗室診斷標準。
上述IFA和ELISA-IgM抗體作為貓抓病血清學(xué)診斷標準,兩者在血清型上很少有不同,并與五日熱巴通體有交叉反應。若需分型應作細菌培養,以進(jìn)一步明確。
4.分子生物學(xué)檢測 近年來(lái)采用PCR、巢式PCR或PCR原位雜交技術(shù),從淋巴結活檢標本、膿液中檢出漢賽巴通體DNA,陽(yáng)性率可達96%。但這種特異性及敏感性高的方法實(shí)驗條件要求較高,難以作為臨床常規檢查。漢賽和五日熱巴通體DNA的PCR檢測,其CAT1、CAT2一對特異性引物,其核苷酸序列(5’→3’)為GATTCAATTGGTTTGAA(G和A)GAGGCT和TCACAATCACCAGG(A和G)CGTATTC,可擴增出414bp片段產(chǎn)物。
5.病理組織學(xué)檢查 對于活檢組織作Warthin-Starry和Brown-Hopps組織染色或組織電鏡檢查,有助診斷。但組織染色不能區別巴通體的不同菌型或其他病原體。
感染早期電鏡檢查,可見(jiàn)血管壁及巨噬細胞內有多形性革蘭陰性的病原體,呈單個(gè)小體或成鏈狀排列或聚集成簇,提示病原體具有親和血管內皮細胞。曾有研究報道本病原體可在貓紅細胞內發(fā)現,提示對紅細胞也具有親和性。通過(guò)患者淋巴結活檢,在病變的淋巴結內可見(jiàn)副皮質(zhì)區及濾泡間出現星狀壞死性肉芽腫。后期形成多灶性小膿腫,然后通過(guò)化膿融合成較大膿腫,膿腫邊緣可見(jiàn)上皮樣細胞,偶見(jiàn)多核巨細胞。淋巴結被膜增厚,經(jīng)數星期至數月后,病變淋巴結內有成纖維細胞增生,逐漸形成瘢痕。在病程1~4周內取病變組織應用Warthin-Starry銀浸染色法可檢出病原體。
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