小兒過(guò)敏癥 的檢查：

皮膚點(diǎn)刺試驗 青霉素皮內試驗 蛋白電泳 過(guò)敏原篩選 巨噬細胞移動(dòng)抑制試驗 被動(dòng)轉移試驗

1.非特異性診斷 有如：血、痰液、鼻涕、眼分泌物、大便、中耳分泌物等的嗜酸性粒細胞檢查;血、其他體液或分泌物中組織胺含量的測定;血清及分泌物中IgE、IgA、IgG、IgM含量的測定;肺功能測定;T淋巴細胞轉化試驗;補體Ch50、Ch2、C3、C4測定;巨噬細胞移動(dòng)抑制試驗;白細胞吞噬指數測定;血及尿中17酮、17羥類(lèi)固醇測定;血漿蛋白電泳測定;紅細胞沉降試驗;血中抗溶血性鏈球菌抗體滴度測定;類(lèi)風(fēng)濕因子測定;抗原抗體復合物測定;血中紅斑狼瘡細胞檢查;以及血、尿、大便的常規檢查等。此等檢測方法對不同的變態(tài)反應病均有其各自的診斷意義，可以選擇采用。
2.體內特異性診斷 目前在變態(tài)反應臨床上采用最廣的體內特異性診斷方法，首推皮膚試驗法。此外還有各種皮膚以外的試驗方法，包括鼻黏膜、支氣管黏膜、眼結膜及口腔黏膜試驗等。
體內特異性診斷的原理是：在外源性過(guò)敏病人的皮膚及體液內含有一種特異性抗體，稱(chēng)為反應素或皮膚敏感抗體，亦即特異性IgE。當相應的抗原通過(guò)不同途徑進(jìn)入皮膚時(shí)，即與反應素相結合，釋放變態(tài)反應活性介質(zhì)，產(chǎn)生局部的過(guò)敏反應，使皮膚充血、水腫、滲出、形成丘疹，在丘疹周?chē)霈F紅斑，這就是特異性皮膚試驗的陽(yáng)性反應。由于進(jìn)入皮膚的抗原的用量和濃度都是經(jīng)過(guò)嚴格控制的，因此這一試驗方法是比較安全的。反應只發(fā)生在局部。但是亦有極少數高度敏感的病人，即使在嚴格控制抗原濃度及劑量的情況下，仍可發(fā)生強烈的全身性反應，甚至有由于皮膚試驗而引發(fā)過(guò)敏休克致死者。如由青霉素皮膚試驗而造成休克死亡的病例已迭有發(fā)生。但自從我們開(kāi)展臨床變態(tài)反應工作40余年來(lái)，采用特異性皮膚試驗已不下數十萬(wàn)人次，尚未發(fā)生過(guò)一例由皮試引起致命反應者。偶見(jiàn)有因特異性皮膚試驗而出現哮喘發(fā)作或周身性蕁麻疹等反應者，經(jīng)過(guò)適當的處理均能及時(shí)控制。這說(shuō)明目前所用的方法，如嚴格掌握操作規程，作好必要的應急準備，總的說(shuō)來(lái)是安全的。
(1)體內特異性診斷的適應證：
①速發(fā)型外源性過(guò)敏的病人或延緩型變態(tài)反應中屬于接觸性過(guò)敏的病人。
②試驗時(shí)病人應不在強烈的過(guò)敏發(fā)作期。
③近期內未使用過(guò)腎上腺皮質(zhì)激素、抗組織胺藥物、腎上腺素、麻黃堿或其他類(lèi)似藥物。
④病人受試部位的皮膚不在非特異性激惹性強烈的狀態(tài)下。例如明顯的皮膚劃痕癥等。此類(lèi)病人如作皮膚試驗容易產(chǎn)生假陽(yáng)性反應。
⑤病人受試部位的皮膚應沒(méi)有濕疹、蕁麻疹或其他皮膚損害。
(2)體內特異性診斷的種類(lèi)和方法：
①貼斑試驗(patch test)：這是一種較為古老的方法，亦稱(chēng)斑貼試驗。早在1896年，瑞士皮膚科醫生Jadasson創(chuàng )用此法以調查可疑藥物過(guò)敏病人的致敏病因。這是一種相當簡(jiǎn)單而安全的方法，至今仍被沿用。
試驗的具體方法是：對可疑過(guò)敏的藥物、食物或吸入物，如屬固體物質(zhì)則先把它研成細末或粉碎，然后取一小撮放置于病人前臂腹面皮膚上，再放一滴0.1mol/L的氫氧化鈉溶液或生理鹽水。輕輕將粉末與水調和，待其半干，外面覆蓋一片不吸水的玻璃紙或塑料薄膜，再以紗布包扎，保持試驗物與皮膚緊密接觸24～48h，然后揭除敷料，觀(guān)察試驗物接觸部分的皮膚有無(wú)紅腫、皮疹、皮癢、潰爛等反應。如有上述情況，即屬陽(yáng)性反應。如皮膚呈輕度紅腫、皮疹、皮癢，屬一度陽(yáng)性反應。如有散在小皮疹出現、明顯癢感，屬二度陽(yáng)性反應。如有成片的皮疹或大皰疹出現，則為三度陽(yáng)性反應。如出現皮膚滲出、潰瘍、壞死等，則屬四度陽(yáng)性反應。如在48h揭開(kāi)敷料觀(guān)察反應時(shí)尚未見(jiàn)特殊皮膚改變，亦可再延長(cháng)接觸時(shí)間24h，待貼斑72h后再觀(guān)察一次;如此時(shí)仍無(wú)任何皮膚反應，即屬陰性反應。
最近，我們對布料、人造纖維及其他固態(tài)的可疑接觸性過(guò)敏原進(jìn)行貼斑試驗時(shí)，采用模擬的人造汗液，作為濕潤劑進(jìn)行貼斑，比應用0.1mol/L氫氧化鈉或生理鹽水更加近似發(fā)病時(shí)過(guò)敏原的自然接觸及吸收狀態(tài)，有更好的效果。人造汗液的配方為：氯化鈉3g，乳酸2ml，硫酸鈉1g，尿素2g，硬脂酸2ml，加入蒸餾水，使總量成為1L。
對原系液態(tài)的接觸變應原，則直接將它涂滴在皮膚表面后加以包扎即可。觀(guān)察斑貼試驗的結果，除于24～48h揭開(kāi)敷貼物后觀(guān)察即刻反應外，還應于揭除斑貼物后12～24h，再看一次局部皮膚是否出現延遲陽(yáng)性反應。
斑貼試驗的缺點(diǎn)在于有不少試驗用過(guò)敏原不能為皮膚所吸收，因而往往得出假陰性的結果。反之，也有一些過(guò)敏原則對皮膚具有一定的非特異性刺激，又可能引起假陽(yáng)性反應。而且每次受試的品種有限，觀(guān)察的時(shí)間又較長(cháng)，對于一些具有強陽(yáng)性反應的病人，應在反應早期即撤除敷貼物，不必等到24h或48h，以免反應過(guò)重造成病人痛苦。
近年來(lái)我們還利用包裝丸藥的塑料鋁膜水泡眼包裝空囊將之洗凈干燥，剪成帽狀備用。使用時(shí)在此小帽內先放入一潔凈脫脂棉小團，然后將所需測試之變應原溶液用滴管滴在棉團上，然后將此小帽扣覆在前臂腹面皮膚上。另用一小帽滴以生理鹽水作為對照同時(shí)扣覆在前臂，用膠布固定小帽，24h，48h分別揭開(kāi)小帽觀(guān)察皮膚反應。此外亦可利用目前市售之“創(chuàng )可貼”繃帶，去其中央含雷文諾爾的紗布片，代之以多層潔凈白紗布，將待測抗原溶液滴在紗布上，然后將之封貼在前臂皮膚上，定時(shí)揭開(kāi)觀(guān)察反應，以上方法封貼穩固，材料易得，操作簡(jiǎn)便，可以一試。有些醫院亦有利用薄鋁片做成的杯狀斑貼帽備斑貼皮試用者。
斑貼試驗最適用于接觸性變態(tài)反應，實(shí)際上此法可以視為接觸性變態(tài)反應的一次皮膚激發(fā)試驗。近年來(lái)化妝品過(guò)敏，化學(xué)劑過(guò)敏以及不少職業(yè)性變態(tài)反應均與皮膚接觸有關(guān)，故試驗的適應性日廣。當前的困難是如何確定測試抗原的最適濃度是一個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題。濃度過(guò)低造成假陰性反應，濃度過(guò)高又可造成假陽(yáng)性反應。國際及北美接觸性皮炎研究組(International and North American Contact Dermatitis Research Group)對少數化學(xué)劑已研討出可供參考的最佳斑貼濃度，有的廠(chǎng)商已將此做成油膏供貼斑皮試之用。
②抓傷試驗(scratch test)：這也是一種比較簡(jiǎn)單而安全的方法。由于試驗時(shí)不需消毒或特殊設備，局部不痛、不出血，結果又較貼斑試驗準確而快捷，故比較適用于兒童。試驗可在病人前臂的外側皮膚上進(jìn)行。如在嬰兒，由于臂部可供測驗的皮膚面積過(guò)小，則可以利用背部?jì)蓚燃珉喂且詢(xún)鹊膮^域。
操作方法：用一把鈍緣的眼科白內障小刀或用一枚化驗室取血用的針，必要時(shí)用普通的粗縫針或注射用針亦可代替。目前我們用的是市場(chǎng)上出售的針灸醫師用的三棱針，由于它針柄較粗長(cháng)，尖端大小適中，便于握持，不易損壞，特在此推薦。
試驗時(shí)先持針在選定的皮膚表面，平行縱劃兩道長(cháng)度為3～5mm、如‖狀的劃痕，亦有交叉劃成十字形或X形者。如所試物為粉狀的過(guò)敏原，則先在抓劃處的皮膚上滴1滴0.1mol/L的氫氧化鈉、生理鹽水或人造汗液，然后用一干凈的金屬小勺取抗原一小勺撒在液體上，輕加搗拌。我們目前采用市場(chǎng)上出售的鋁制耳挖勺，價(jià)廉而適用，耳勺的另一端圓鈍部分可用于搗拌。如所試是液態(tài)抗原，則在抓劃處滴上1滴抗原，待其自然晾干即可。
待抗原接觸皮膚抓劃處15～20min后，即可觀(guān)察反應。抓傷試驗結果的判定，往往各家有各自的經(jīng)驗與標準。我們慣用的標準是：
A.抓劃處皮膚稍隆起，周邊有一淡紅斑時(shí)為(+)。
B.抓劃處有丘疹樣隆起，其長(cháng)度超出抓劃的范圍，并在丘疹周邊有明顯紅斑者，為(++)。
C.抓劃處丘疹有偽足，四周有較寬，色紅而邊緣不規則的紅斑反應者，為(+++)。
D.抓劃處丘疹有2個(gè)以上偽足，發(fā)癢，四周皮膚紅腫明顯者，為(++++)。
抓傷試驗的注意事項：如同時(shí)進(jìn)行多種抗原測試，則每一抗原的試驗次序與部位必須記憶清楚;必要時(shí)應在皮膚上作出標記，以免相互混淆。如用編組的多種抗原進(jìn)行皮試，則每種抗原的前后次序應熟記。如用上臂外側皮膚進(jìn)行試驗時(shí)，則抗原的排列程序，習慣上是由上而下，由左至右，每5種為1行，每臂分內外2行，可共作10種，兩臂同時(shí)可作20種抗原的皮膚試驗。如用背部肩胛間皮膚做試驗，受試者若為成人，則從上到下，每行可作1O種，從左至右共6行，故每次可同時(shí)作60種抗原的皮膚試驗。
試驗時(shí)抓劃中所用的針及小勺應多準備數十至數百套，用完棄去以防抗原混雜，發(fā)生交叉反應。每一種試驗的上下左右間距離，至少3～5cm。一般測試部不必用酒精消毒皮膚，以免酒精引起的充血反應干擾觀(guān)察結果。對于個(gè)別病人皮膚太臟者，可先用清水及肥皂清洗，待干后試驗。如測試后15min內皮試處已出現強烈反應，可用棉花蘸蒸餾水將抗原拭去以免反應進(jìn)一步發(fā)展。
③點(diǎn)刺試驗(prick test)：也稱(chēng)穿刺或挑刺試驗(puncture test)，此法實(shí)際上是抓傷試驗的一種改良。由于方法簡(jiǎn)單方便，近年來(lái)國外變態(tài)反應界采用此法者頗多。方法為，先在皮試部位滴上1滴抗原，然后用特制的點(diǎn)刺針在滴有抗原的皮膚中央點(diǎn)刺一下，將針尖按至皮內約1mm，然后輕輕挑開(kāi)上皮即可，不必過(guò)深，以不出血為度。亦有人利用16或17號的平頭注射針(如腮腺導管造影時(shí)所用注射造影劑的針頭)用于點(diǎn)刺試驗的。用時(shí)先將針頭放入抗原瓶中，使針管內灌入少量抗原溶液，然后以此針按壓點(diǎn)刺病人皮膚，效果亦頗滿(mǎn)意。
最近，我們亦利用鋸成小段的直徑3mm的細玻璃管作點(diǎn)刺試驗。其優(yōu)點(diǎn)為管壁光潔，容易清洗，不生銹，少污染，價(jià)格便宜;如用此為兒童作皮試時(shí)，亦不致使兒童見(jiàn)針驚恐。由于玻管價(jià)廉，有的每用1次即可棄去，不再消毒重用。試驗時(shí)應注意防止玻管折斷。點(diǎn)刺試驗的觀(guān)測標準及注意事項，大致與抓傷試驗相同。隨著(zhù)點(diǎn)刺試驗的推廣，近年國內外均已制造出形狀不同的一次性不銹鋼點(diǎn)刺針備用。用后棄去，十分方便，進(jìn)針深度受針柄肩部的限制，可以控制劃一。點(diǎn)刺試驗在國外，歐洲用得比北美更為廣泛。
進(jìn)入20世紀80年代以來(lái)，點(diǎn)刺試驗日益推廣，點(diǎn)刺器械亦數經(jīng)改進(jìn)。在美國設計了一種稱(chēng)之為Multitest的塑料點(diǎn)刺器，分為兩排，每排有4個(gè)點(diǎn)刺針頭，針頭做成刷狀。并配有8種常用變應原試液。操作時(shí)將8種變應原分別滴在8個(gè)點(diǎn)刺針頭上。將之按壓在病人前臂腹面皮膚，一次點(diǎn)刺同時(shí)可作8種變應原的試驗。意大利還設計了一種同時(shí)可作32種不同變應原測驗的塑料點(diǎn)刺器，點(diǎn)刺針頭為圓錐狀，針頭尾部均有一增粗的“肩”以控制進(jìn)針深度，此種點(diǎn)刺器稱(chēng)之為普列洛測試器。
瑞典的Pharmacia公司將各種不同的變應原包被在不銹鋼的點(diǎn)刺針頭上，分別消毒密閉包裝備用，測試時(shí)只要打開(kāi)包裝，取出點(diǎn)刺針直接在病人皮膚上點(diǎn)刺即可，不必再用任何液體的變應原。這種點(diǎn)刺試驗稱(chēng)之為“干點(diǎn)刺試驗(dry prick test)”，極為方便，它的優(yōu)點(diǎn)還由于抗原處于干燥狀態(tài)不易降解，故使用的有效期可增至3年。上列各種點(diǎn)刺器均為一次性使用，無(wú)抗原交叉或操作污染之虞，并均備有陰性及陽(yáng)性對照。由于點(diǎn)刺試驗操作比皮內試驗簡(jiǎn)便而安全。更適用于兒童，有些地區已取代皮內試驗。
④皮內試驗(intradermal test或intracutaneous test)：這是目前各種體內特異性試驗中應用最廣、結果較可靠、測試劑量控制較嚴格的一種試驗方法。我們多年來(lái)在臨床上主要是采用本法來(lái)進(jìn)行特異性過(guò)敏原檢查的。它可用于食物、吸入物、某些藥物及昆蟲(chóng)毒液等的測試，其操作方法如下：
一般亦用上臂外側皮膚為受試區，令病人側坐，暴露全臂，以70%酒精消毒皮膚，用結核菌素注射器及針體長(cháng)1cm左右的26或27號皮內針頭抽取試液。目前在西方已普遍采用一次性注射器，國內亦在逐步推廣一次性注射器。為安全計，不久，國內亦將普及推廣。試液的濃度按各自的經(jīng)驗不同而有所出入。目前我們采用的吸入性抗原，包括屋塵、羽毛、皮毛、舊棉絮、煙草、真菌、花粉等，采用1∶100濃度。對于食物抗原中不含刺激性的蔬菜、水果、谷物之類(lèi)，用1∶10濃度。對于魚(yú)、肉、蝦、蟹、雞蛋、牛奶及蔥、蒜、姜、辣椒等高蛋白食物或帶刺激性的食物，則采用1∶100濃度。對于個(gè)別效價(jià)較強的抗原，如蒿屬花粉、螨等，我們采用1∶1000或1∶1萬(wàn)的濃度。還有一些效價(jià)特強的抗原物質(zhì)，如蛔蟲(chóng)浸液等，我們曾用過(guò)1∶10萬(wàn)的濃度。每個(gè)變態(tài)反應臨床工作者，對于自己所用的各種抗原的效價(jià)，必須有一個(gè)大致的了解，以便掌握適當的測試濃度，防止不良反應或意外。
試驗按照習慣的程序，自上而下，由左到右地逐個(gè)進(jìn)行。在每一試區用皮內針頭刺入表皮淺層后，進(jìn)針約2～3mm，推入試液約0.01～0.02ml。每一試區的間距至少為3cm。皮試后15min即可觀(guān)察反應結果，反應結果的判定標準如下：
A.受試者皮膚丘疹直徑在5mm以下，周?chē)鸁o(wú)紅斑形成，或僅有輕微紅斑反應者為陰性。
B.皮膚丘疹直徑在5～10mm之間，周?chē)休p紅斑反應者，為(+)。
C.皮膚丘疹直徑在10～15mm之間，周?chē)袑挾仍?0mm以上之紅斑反應帶者，為(++)。
D.皮膚丘疹直徑在15mm以上或丘疹不規則，出現偽足，周?chē)袑挾仍?0mm以上之紅斑反應帶者，為(+++)。
E.局部反應同(+++)，而且同時(shí)出現周身反應，如周身皮癢、皮疹、皮膚潮紅、憋氣感、哮喘發(fā)作等癥狀者，為(++++)。
在進(jìn)行皮內試驗時(shí)，應注意針管針頭的消毒，針管上應標以所裝抗原之名稱(chēng)及濃度，以預防相互混雜。在變態(tài)反應專(zhuān)科門(mén)診，每天要為大量病人進(jìn)行皮內試驗，故應準備多個(gè)金屬制的注射器盒，編號消毒后依次裝入盛有各種抗原的注射器。注射用皮內針頭亦應大量準備，用過(guò)一次即應更換。注射器則不必每人更換一次。每次門(mén)診后，應將皮內針頭一一檢查有無(wú)倒鉤、變鈍等情況，如發(fā)現有倒鉤或遲鈍則應隨時(shí)磨利，以保證下次檢查的順利進(jìn)行。
皮試注射完畢后，在病人等候觀(guān)察反應的15～20min內，應隨時(shí)觀(guān)察病人有無(wú)全身性反應出現，如唇麻、掌癢、全身搔癢、皮色潮紅、咳嗽、哮喘、胸悶、脈搏細速等情況。如有此類(lèi)情況，應立刻讓病人躺下休息，根據反應輕重給予適當的措施，輕者可以針刺病人手掌掌心或人中、印堂、十宣等穴。有胸悶咳喘者給以異丙基腎上腺素或沙丁胺醇(舒喘靈)等類(lèi)藥物吸入。重者應注射腎上腺素，吸氧，甚至人工呼吸、靜脈內注射腎上腺素等。20余年來(lái)，我們在為數以幾十萬(wàn)計的病人進(jìn)行皮內試驗中，雖亦曾發(fā)生過(guò)若干例較重的皮試后反應，均因及時(shí)處理而安然恢復。
近年來(lái)我們對皮試后出現全身反應的病人進(jìn)行手掌掌心針刺，收到很好的效果。其方法為用1.5寸(1.5寸=3.3cm)的針灸針刺入病人兩側手掌中心，進(jìn)針約1寸左右，稍加搗捻，留針10min左右。一般于針刺后3～5min情況即見(jiàn)逐漸恢復。此外異丙基腎上腺素、沙丁胺醇(舒喘靈)、特布他林(喘康速)等氣霧吸入對皮試后出現哮喘發(fā)作的病人亦頗有效。故消毒好的針灸針、異丙基腎上腺素、舒喘靈氣霧劑，以及注射用的腎上腺素、麻黃素(麻黃堿)等亦應在門(mén)診隨時(shí)準備著(zhù)，以防皮試后周身性反應的發(fā)生。
皮內試驗時(shí)還應防止局部感染。除了在操作時(shí)嚴格無(wú)菌技術(shù)外，還要隨時(shí)檢查皮試用抗原有無(wú)污染。因為反復用針頭抽吸瓶?jì)瓤乖站每蓭нM(jìn)污染物。故每次抽藥時(shí)應注意觀(guān)察藥液有無(wú)混濁或沉淀產(chǎn)生，平時(shí)抗原應經(jīng)常貯藏在4℃左右的冰箱內。配好的皮試用抗原，使用1個(gè)月左右后應重配更新。
在變態(tài)反應診室工作的醫生、護士或技術(shù)員之間，應密切配合。皮膚試驗一般均由護士或技術(shù)員操作，試驗中一旦發(fā)生特殊情況，應隨時(shí)報告醫生，共同配合采取措施。醫生在采集病史或檢查中，如發(fā)現病人對某物有強烈過(guò)敏反應者，亦應提醒皮試者，以便皮試時(shí)注意觀(guān)察，必要時(shí)可換用較高稀釋度的抗原進(jìn)行皮試，亦可在皮內試驗前先作貼斑試驗或抓傷試驗，以策安全。
在皮內試驗時(shí)，應防止將空氣注入皮內;一旦注入，局部皮膚即可能出現假陽(yáng)性反應。由于注入空氣而造成的皮膚假陽(yáng)性反應有時(shí)可呈“濺潑現象”，因為空氣注入后可分散為多數小氣泡，竄向四處皮內組織，引起分散成星星點(diǎn)點(diǎn)的皮膚紅斑，這與抗原注入后出現的片狀反應不同，經(jīng)仔細觀(guān)察可以與前面敘述的真實(shí)陽(yáng)性反應區別。進(jìn)行皮內試驗注射時(shí)應避開(kāi)血管，進(jìn)針后應先回抽無(wú)血，方能推藥，以防止試液直接進(jìn)入血管，造成強烈反應。
一般在全組抗原皮試完成后，應在鄰近部位再用生理鹽水或提取抗原之溶媒做一皮內對照試驗，以排除非特異性刺激造成假陽(yáng)性反應的可能性。同時(shí)還用0.1mg/ml的磷酸組織胺溶液作一陽(yáng)性對照試驗，以排除可能出現的假陰性反應。冬季為病人進(jìn)行皮試時(shí)，應注意保暖，防止病人受涼感冒。
在變態(tài)反應科診室內為病人進(jìn)行皮內試驗時(shí)，每天需用大量結核菌素注射器，每個(gè)注射器的筒管與筒芯應加編號，清洗時(shí)應逐個(gè)進(jìn)行，以免筒管與筒芯不能配對而造成漏液或筒芯不能插入筒管等情況。
⑤眼結膜試驗(conjunctival test)：由于眼睛的球結膜及瞼結膜上均有豐富而排列整齊的毛細血管網(wǎng)，眼結膜的背景又極光亮而潔凈，是一種觀(guān)察抗原抗體反應的良好場(chǎng)所，而且反應又很迅速，所以在某些情況下，可以利用眼結膜進(jìn)行過(guò)敏原特異性試驗。其方法為：先用1∶1000的抗原一滴滴入病人右眼，若5min后未出現眼癢、眼紅、流淚、結膜充血等現象，可再用1∶100抗原滴入1滴，再觀(guān)察5min。如仍無(wú)反應，必要時(shí)可再用1∶10抗原滴入1滴，如仍無(wú)反應，則屬陰性。如果抗原滴入后出現眼紅、眼癢、流淚、結膜充血、甚于眼瞼水腫現象，則屬陽(yáng)性反應。可同時(shí)在左眼滴入1滴生理鹽水或抗原提取溶媒作為對照。其陽(yáng)性反應的分級標準為：鞏膜及結膜輕度充血(+);鞏膜及結膜明顯充血，眼輕癢(++);鞏膜及結膜全紅，明顯眼癢及流淚(+++);在(+++)基礎上還出現結膜出血，眼瞼水腫等(++++)。
這個(gè)方法的優(yōu)點(diǎn)是反應快速、現象清楚生動(dòng)，對于某些可疑藥液的過(guò)敏，亦可做此試驗。但有下列缺點(diǎn)：凡一切帶刺激性的抗原均不宜采用。此法每次只能進(jìn)行一種抗原的測試，如作多種的抗原測試，則不合適。
⑥鼻黏膜激發(fā)試驗(nasal mucosa provocation test)：試驗可分為兩種，一種是抗原吸入試驗(inhalation test)，即將抗原由鼻內吸入以激發(fā)過(guò)敏性鼻炎的癥狀。近30余年來(lái)，我們在臨床上對于一些花粉癥過(guò)敏病史典型而皮內試驗陰性者進(jìn)行過(guò)不少這種試驗，發(fā)現其中有半數以上的病人可以誘發(fā)不同程度的花粉癥發(fā)作癥狀。操作方法為：將極少量干花粉置入病人鼻腔，數分鐘之后，病人即出現陣發(fā)性噴嚏、流清水鼻涕、鼻塞、鼻癢等癥狀。檢查可見(jiàn)鼻黏膜蒼白、水腫，分泌物大量增加。有的病人同時(shí)出現哮喘發(fā)作。此時(shí)從病人鼻分泌物或痰液中可以檢到大量嗜酸性細胞。
這一試驗表現生動(dòng)，對病人和醫生均有很好的說(shuō)服力。其缺點(diǎn)為每次只能作一種抗原的測試。激發(fā)用抗原的劑量應嚴格控制，以防止強烈反應的發(fā)生。我們在進(jìn)行此類(lèi)試驗中，有誘發(fā)哮喘者，但經(jīng)過(guò)適當的處理，喘息即告平復。另一種是抗原鼻內滴入試驗(instillation test)。各種吸入性抗原浸液均可經(jīng)鼻內滴入，以測試其敏感性。在臨床上，我們亦曾試用過(guò)某些花粉浸液鼻內滴入激發(fā)試驗，發(fā)現其陽(yáng)性率遠不如干花粉吸入激發(fā)者為高。此外亦可用被測抗原浸液滴在1.0cm×1.0cm見(jiàn)方的白色濾紙片上，然后將紙片敷貼在一側鼻腔的下鼻甲黏膜上進(jìn)行激發(fā)，但其反應強度遠不如干花粉直接激發(fā)明顯。
⑦氣管內激發(fā)試驗(bronchial provocative test)：與鼻黏膜激發(fā)試驗相似，可以采用抗原氣霧吸入激發(fā)，或用抗原浸液氣管內滴入激發(fā)。亦有人采用氣霧吸入或氣管內滴入組織胺進(jìn)行非特異性激發(fā)試驗以測定病人支氣管的反應性。但對組織胺或乙酰膽堿吸入或滴入的方法，目前還有爭論。有人認為，即使正常人吸入或滴入上列藥劑，亦可誘發(fā)哮喘。正常的誘發(fā)劑量對不同年齡、性別、體重的病人均不一樣。至于抗原的氣管內吸入或滴入激發(fā)試驗，近年頗受?chē)獾闹匾暎兄瞥鰧?zhuān)門(mén)的儀器，進(jìn)行精確的定量控制，并結合肺功能的測定，以判斷病人支氣管對各種特異性抗原的敏感程度。
⑧離子透入試驗(iontophoresis test)：利用離子透入裝置，將抗原電離后透入受試病人的皮膚或其他表層組織，以觀(guān)察病人的特異反應。這種試驗的先決條件是抗原必須為可以電離的物質(zhì)，而且先要了解抗原電離后是以陽(yáng)離子方式還是陰離子方式游離的，以便選擇不同的電極進(jìn)行透入。而且還要求抗原電離后不影響它的抗原效價(jià)。它的優(yōu)點(diǎn)是無(wú)痛，但是操作比較繁復，需要一套特殊的裝備，而且還有較多的環(huán)節可能影響其結果，故難以推廣。目前只用于某些實(shí)驗性研究。
⑨舌下試驗(sublingual test)：因為舌下有豐富的血管，黏膜菲薄，若用各種食物、吸入物抗原浸液或可溶性藥物置于舌下，短時(shí)間內即可被吸收而產(chǎn)生相應的過(guò)敏癥狀。其缺點(diǎn)為安全劑量與有效劑量之間的尺度難控制;每次亦只能作一種抗原的試驗;作食物試驗時(shí)病人于受試前24h應先停止食用同類(lèi)食物。舌下試驗的陽(yáng)性反應往往不表現在舌下局部而表現在呼吸、消化、循環(huán)等系統。故必須由有經(jīng)驗的測試者仔細觀(guān)察方可判明。舌下試驗的創(chuàng )始人美國變態(tài)反應學(xué)家G.Pfeiffer數十年來(lái)一直在臨床上采用此法為病人進(jìn)行變態(tài)反應的特異性診斷。
⑩食物激發(fā)試驗(food provocation test)：這種試驗適用于有對某種食物過(guò)敏歷史而經(jīng)過(guò)特異性皮膚試驗結果又與病史不符的病人。為了進(jìn)一步明確病人對該類(lèi)食物的敏感性情況，可以試用此種試驗。其方法為：病人于受試前24h禁止進(jìn)用此類(lèi)食物，試前當天最好空腹或僅進(jìn)少量普通飲食。試驗前先為病人測試脈搏、血壓、呼吸及白細胞計數，然后讓病人進(jìn)食可疑食物，食用量可按病情決定。例如：對小麥面過(guò)敏者可食用一個(gè)面包或饅頭;對雞蛋過(guò)敏者，可一次食用2個(gè)雞蛋;對牛奶過(guò)敏者可一次飲用半磅牛奶。然后留病人在院觀(guān)察3h左右。其間于進(jìn)食后0.5，1.5，2.5h各測脈搏、呼吸、血壓及白細胞計數一次，觀(guān)察有無(wú)呼吸、脈搏明顯增快，血壓或白細胞計數下降等情況。同時(shí)觀(guān)察病人有無(wú)腹痛、惡心、嘔吐、皮疹、皮癢、腹瀉、頭痛、噴嚏、哮喘等過(guò)敏癥狀發(fā)生，并一一記錄之。如果進(jìn)食后3h內病人出現相應的過(guò)敏癥狀，并有呼吸脈搏明顯增快，或白細胞總數下降與激發(fā)前比相差1000以上者，則為陽(yáng)性反應。這種試驗亦稱(chēng)為白細胞減少指數試驗。對于此類(lèi)試驗，近年來(lái)我們先后已作過(guò)數十例，對有些病人反應明顯，但亦有不少病人試驗后并無(wú)特殊反應。受試病人于次日還應來(lái)院隨診一次，以觀(guān)察有無(wú)后期反應。這種試驗的缺點(diǎn)亦在于手續繁復。每次門(mén)診最多只能作1～2個(gè)病人，而且每個(gè)病人只能作一種食物測試。但如果試驗中出現明顯的陽(yáng)性激發(fā)癥狀，則它在食物過(guò)敏特異性診斷中的真實(shí)意義與生動(dòng)性還是不容否認的。如條件允許，上列各種特異性激發(fā)試驗均應將病人收入病房?jì)冗M(jìn)行，以便持續觀(guān)察，并保證安全。
被動(dòng)轉移試驗(passive transfer test)：亦稱(chēng)普-科二氏試驗(Prausnitz Küstner test，簡(jiǎn)稱(chēng)P-K試驗)。這是利用過(guò)敏病人的特異性循環(huán)抗體在血清中可以被動(dòng)轉移的特性而發(fā)展起來(lái)的，是人類(lèi)歷史上第一個(gè)在人體上所做的體外變應原特異性診斷的成功范例。適用于不能在自體進(jìn)行特異性皮試的幼嬰、嚴重剝脫性皮炎患者、躁動(dòng)不安無(wú)法接受皮試操作者、嚴重的人工蕁麻疹患者皮膚呈普遍的假陽(yáng)性反應者、其他嚴重皮膚病或重癥病人不能提供自身皮試者等。試驗前應先選定適當的志愿受試者，一般均由病人的父母或親屬承擔。試前應為病人作有關(guān)傳染性肝炎或其他可能由血清傳染的疾病的血清學(xué)檢查，證明無(wú)上列傳染病方可進(jìn)行此類(lèi)檢查。試驗前24h病人及志愿受試者均不能用腎上腺素、腎上腺皮質(zhì)激素或抗組織胺類(lèi)藥物。試驗時(shí)先從病人身上采血10ml，裝入無(wú)菌試管離心或自然立放24h，以分離血清。在無(wú)菌操作下取分離得的血清在志愿受試者背部皮內按準備測驗的抗原數目，順序作多點(diǎn)皮內注射。每一處注射血清0.1ml，并在注射處用鋼筆畫(huà)圈做好標記。24～48h后在畫(huà)圈的血清轉移部位，按皮內試驗法作各種抗原的特異性試驗。試前志愿受試者亦不能大量接觸食用所欲測試的各種吸入物或食物。試驗結果的判定按一般皮內試驗法標準記錄。最近亦有人報道利用猴、猩猩等靈長(cháng)目動(dòng)物作為受試者的。
P-K試驗為變態(tài)反應病的特異性抗體的客觀(guān)存在提供了有力的依據，對變態(tài)反應的理論性研究是一個(gè)很大的貢獻。我們在臨床實(shí)踐中認為它亦是有一定應用價(jià)值的，例如：患兒陳××，女，5歲，有支氣管喘息，皮內試驗發(fā)現對屋內塵土、魚(yú)、芝麻有強陽(yáng)性反應;繼由患兒父親作為志愿受試者進(jìn)行了被動(dòng)轉移試驗，結果與自身皮試的反應完全相符。但是另一方面，由于被動(dòng)轉移試驗手續繁復而費時(shí)，要求條件嚴格，有可能傳播傳染性肝炎、梅毒、艾滋病等，如無(wú)肯定的適應證應審慎采用。
菌苗特異性試驗(specific bacterial vaccine test)：近年來(lái)，我們對一部分久治不愈的支氣管哮喘及過(guò)敏性鼻炎或過(guò)敏性鼻竇炎患者進(jìn)行呼吸道細菌性過(guò)敏的探索。為病人進(jìn)行自身的呼吸道細菌培養及菌苗制備，然后用所得菌苗為病人進(jìn)行皮膚試驗。一般采用每毫升含5億死菌的菌苗，按1∶1000、1∶100和1∶10加以稀釋?zhuān)缓蠓謩e為病人進(jìn)行皮內試驗，先于15min時(shí)觀(guān)察一次即刻反應，然后分別觀(guān)察24h及48h的延緩反應。結果發(fā)現，大多數病人即刻反應均不明顯，24～48h延緩反應則個(gè)別有(+)或(++)陽(yáng)性反應者;但極少見(jiàn)有(+++)以上反應。一度我們還以卡他球菌、甲類(lèi)鏈球菌、金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、肺炎球菌、流感桿菌、變形桿菌及大腸埃希桿菌等9種從呼吸道過(guò)敏病人鼻或咽部取得的菌種制成混合菌苗，作為常規的皮內試驗項目，為呼吸道過(guò)敏的病人進(jìn)行皮內試驗，發(fā)現其陽(yáng)性率亦不高。但是利用細菌性抗原進(jìn)行特異性皮膚試驗，作為細菌性傳染病的特異性診斷，歷史已極悠久。臨床上最常用者為結核菌素試驗，作為結核菌感染的特異性診斷，至今有重要的價(jià)值;它的陽(yáng)性反應程度，可視為一種判斷細胞免疫功能的重要指標。
根據上列各種變態(tài)反應的體內特異性診斷方法，說(shuō)明變態(tài)反應的特異性診斷已經(jīng)發(fā)展成為一系列很有意義的診斷手段，具有很重要的理論和臨床實(shí)用價(jià)值。但是從另一方面看，體內特異性診斷的正確性尚有一定的限制，臨床試驗中假陽(yáng)性和假陰性的結果還時(shí)有發(fā)生。試驗結果與主觀(guān)誘因的符合率還存在著(zhù)一定的差距。所以，在進(jìn)行特異性皮膚試驗做出特異性診斷時(shí)，還必須結合病史、發(fā)病的時(shí)間、地點(diǎn)、病人工作或職業(yè)特點(diǎn)、客觀(guān)體征等，作綜合而全面的分析調查，方能做出比較正確的結論。
1.放射診斷 包括胸部透視、攝片、支氣管造影，鼻旁竇X線(xiàn)攝影，胃腸造影等，對某些變態(tài)反應病亦有重要的診斷意義。特別對過(guò)敏性肺炎、過(guò)敏性鼻竇炎的診斷，X線(xiàn)檢查有特殊的重要價(jià)值。此外，X線(xiàn)檢查有助于鑒別其他非變態(tài)反應性疾病和排除并發(fā)癥。近代影像診斷包括：B超、CT、磁共振等，必要時(shí)亦應用于變態(tài)反應病的輔助診斷。
2.藥劑診斷 對于某些變態(tài)反應病，在經(jīng)過(guò)各種檢查不能確認的情況下，亦可以采用某些對變態(tài)反應有良效的藥物，如腎上腺素、β2受體興奮藥、各種抗組織胺藥物、各種腎上腺皮質(zhì)激素類(lèi)藥物等，進(jìn)行試探性治療。如經(jīng)過(guò)用藥療效卓著(zhù)，則可以從側面引證變態(tài)反應病的診斷。但在進(jìn)行這種試探性藥劑診斷時(shí)，必須全面考慮病情，排除所試用藥物對病人的禁忌情況和可能產(chǎn)生的副作用。