溶血性乙型腦炎補體結合試驗概述
流行性乙型腦炎(簡(jiǎn)稱(chēng)乙腦)是由乙型腦炎病毒引起,該病毒產(chǎn)生的血凝素能使雛雞、鴿、鵝和綿羊等紅細胞凝集。成熟的乙腦病毒有V1、V2和V3三個(gè)結構蛋白,用相應的單克隆抗體證明,V3有4個(gè)與免疫相關(guān)的抗原點(diǎn),其一為中和抗體決定簇,另兩個(gè)為組和亞組特異性抗原決定簇,還有一個(gè)既有血凝也有中和抗原決定簇。此外,乙腦病毒還有型特異性的可溶性補體結合抗原。乙腦患者受上述病毒抗原的激發(fā),病后血中可產(chǎn)生血凝抑制抗體,中和抗體和補體結合抗體,據此檢測患者上述三種抗體可作為該病的血清學(xué)診斷指標,通常用免疫測定或免疫熒光技術(shù)檢測特異性IgM抗體,具有早期診斷意義。
溶血性乙型腦炎補體結合試驗正常值
<1:16。
溶血性乙型腦炎補體結合試驗臨床意義
(1)乙腦患者補體結合抗體一般出現較晚,據報道發(fā)病1~2w,該抗體陽(yáng)性者僅12.8%,僅維持半年,凡受檢者該抗體陽(yáng)性必然是新近感染,故單份恢復期血清大于或等于1∶16即有診斷意義。
(2)一般雙份血清檢測所得抗體效價(jià)有4倍以上增長(cháng)即有診斷價(jià)值。如雙份血清的抗體效價(jià)均為1∶8或更高,而恢復期血清并無(wú)4倍以上增長(cháng),則須分析是否急性期標本采取時(shí)間過(guò)晚,故需重行采集恢復期血復查,籍以判定抗體效價(jià)與本次感染的關(guān)系。如仍有疑問(wèn)則需用中和試驗加以對比核實(shí)。
結果偏高可能疾病:
流行性乙型腦炎。
溶血性乙型腦炎補體結合試驗檢查方法
取材:血液。
溶血性乙型腦炎補體結合試驗的原理:乙腦患者可產(chǎn)生特異性的補體結合抗體,故常規補體結合試驗也是診斷乙腦的血清學(xué)診斷指標之一。
試劑:
(1)抗原制備方法同血凝素,并以健康鼠腦同法制備正常組織抗原。
(2)鼠抗乙腦病毒血清,一般要求效價(jià)為l∶64或更高。
操作方法:
(1)綿羊紅細胞懸液,溶血素和補體均應先行滴定,各配成最適工作濃度。
(2)抗原滴定,用倍比稀釋的抗原和抗血清作方盤(pán)滴定,凡能與最高稀釋度血清結合而出現完全不溶血的最高稀釋度抗原量為1U,如1∶16為1U抗原,實(shí)驗用2U即1∶8稀釋抗原。
(3)正式試驗:受檢血清經(jīng)56℃30min滅活后,先作1∶4或1∶8稀釋?zhuān)悦飧邼舛妊鍖е路翘禺愋越Y合,繼作倍比稀釋?zhuān)囱a體結合試驗常規操作。凡不溶血的為陽(yáng)性,溶血為陰性,對照管結果應符合要求。結果計算是以呈現陽(yáng)性的受檢血清最高稀釋度為該受檢血清的補體結合抗體效價(jià)。
溶血性乙型腦炎補體結合試驗注意事項
乙腦中和抗體是證實(shí)乙腦感染的重要指標,但其檢測常用小鼠、地鼠腎以及雞胚細胞等進(jìn)行,其原則是該抗體與病毒結合后,使病毒失去感染力,據此分別根據小鼠死亡率、地鼠腎細胞培養的病變以及雞胚單層細胞空斑減少,分別測出抗體效價(jià),方法雖敏感,但操作麻煩,一般檢測難以完成,需送專(zhuān)業(yè)病毒研究所檢測。