脫氧核糖核酸染色正常值
幼稚血細胞脫氧核糖核酸顆粒堆積、聚集、染色深、成熟血細胞脫氧核糖核酸顆粒分布均勻,細小,染色淺。
脫氧核糖核酸染色臨床意義
(1)鑒別細胞的成熟程度,如小原粒細胞與成熟淋巴細胞的區別,小原粒細胞染色淺、核仁明顯;淋巴細胞染色深。
(2)鑒別急性白血病的類(lèi)型,原淋巴細胞反應較強,染色質(zhì)染成粗顆粒;原粒細胞核反應減弱,染色質(zhì)呈較淡的細顆粒狀;原單核細胞反應最弱,染色質(zhì)呈纖細網(wǎng)狀,染色較淺。
(3)鑒別巨幼紅細胞與正常紅細胞,巨幼紅細胞核染色淡呈細網(wǎng)狀,正常紅細胞核染色深呈粗顆粒至塊狀。
脫氧核糖核酸染色檢查方法
(1)新鮮抗凝血標本,用比重1.077的淋巴細胞分離液作密度梯度分離,取淋巴細胞層細胞離心涂片,空氣干燥。或不作細胞分離,直接涂片。
(2)涂片用過(guò)氧化氫-甲醇液于4℃下固定20~30min,以阻斷細胞的內源性過(guò)氧化酶。
(3)涂片在0.1mol/L磷酸鹽緩沖液中浸泡15min,滴加正常兔血清,以減少抗體非特異性結合。
(4)滴加兔抗牛TdT抗體,37℃保溫30min。
(5)滴加羊抗兔IgG抗體,37℃保溫30min。
(6)滴加PAP免疫復合物,37℃保溫30min。
(7)將涂片浸入DAB溶液,室溫作用5~10min。
(8)水洗5min,干后鏡檢,或用哈氏蘇木素染液復染胞核10min。
脫氧核糖核酸染色注意事項
操作中4~6每次均需用0.1mol/L磷酸鹽緩沖液沖洗2次,以免沉渣出現。浸入DAB溶液作用應避光操作。DAB為致癌劑應注意皮膚防護。