腦脊液的顯微鏡檢查概述
腦脊液顯微鏡檢查是通過(guò)對腦脊液細胞計數和分類(lèi)計數,從而為判斷各種疾病提供依據。
腦脊液的顯微鏡檢查正常值
正常人腦脊液中有少量的白細胞,無(wú)紅細胞。細胞數為:成人:(0-8)×106/L兒童:(0-15)×106/L 腦脊液中細胞多為大單核細胞和淋巴細胞,兩者之比約為3:7,偶見(jiàn)內皮細胞。
腦脊液的顯微鏡檢查臨床意義
異常結果: (1) 腦脊液細胞數可增多,其增多的程度及細胞的種類(lèi)與病變的性質(zhì)有關(guān)。可能是中樞神經(jīng)系統病變。 (2) 腦脊液細胞數可中度增多,常以淋巴細胞為主,為中樞神經(jīng)系統病毒感染、結核性或霉菌性腦膜炎。 (3) 腦脊液細胞數顯著(zhù)增加,以中性粒細胞為主,為細菌感染時(shí)如化膿性腦膜炎。 (4) 腦寄生蟲(chóng)病時(shí),可見(jiàn)較多的嗜酸性粒細胞。 (5) 腦室或蛛網(wǎng)膜下腔出血時(shí),腦脊液內可見(jiàn)多數紅細胞。 (6) 有時(shí)可在腦脊液中找到紅斑狼瘡細胞,為紅斑狼瘡病。 (7) 化膿性腦膜炎經(jīng)過(guò)有效的抗生素治療后,細胞總數迅速下降;結核性腦膜炎患者在早期以中性分葉核細胞為主,以后則淋巴細胞較多;腦血管意外病人腦脊液中的紅細胞數目減少,結合臨床,預示著(zhù)出血既將停止或已經(jīng)停止。 需要檢查人群:中樞神經(jīng)系統感染性疾病,腦血管病,腦寄生蟲(chóng)病,中樞神經(jīng)系統腫瘤。
腦脊液的顯微鏡檢查檢查方法
主要分五項檢查:
一、 細胞總數
1、直接計數法適用于腦脊液標本比較清亮或微混。用滴管吸取已混勻的腦脊液標本少許,直接滴入細胞計數板,充入計數池內,靜置2~3分鐘,低倍鏡下計數兩個(gè)池內的四角和中央大格共10個(gè)大格內的細胞數,即為1μl腦脊液中的細胞總數(紅、白細胞總數)。在書(shū)寫(xiě)報告時(shí),再換算成每升腦脊液中的細胞總數。
2、稀釋計數法適用于如果腦脊液的細胞過(guò)多、混濁或帶血的腦脊液。可用血紅蛋白毛細吸管吸取混勻的腦脊液20μl,加入有紅細胞稀釋液0.38μl的小試管中,混勻后滴入計數池內,用低倍鏡計數4個(gè)大方格的細胞總數,乘以50,即為每微升腦脊液的細胞總數,最后換算成每升腦脊液的細胞總數報告。
二、白細胞計數
1、直接計數:非血性標本,用吸管吸取冰乙酸后全部吹出,使管壁僅附著(zhù)少許冰乙酸,然后用同一吸管吸取少量混勻的腦脊液標本,數分鐘后紅細胞就會(huì )完全溶解,再滴入計數池內,按上法計數。
2、稀釋計數 :如白細胞過(guò)多,可用白細胞稀釋液稀釋后,按上法計數,注意計數結果應乘以稀釋倍數。
3、血性標本的校正計數: 混有血液的腦脊液標本混勻后,用1%的冰乙酸溶液稀釋后仍按上法計數。為了剔除因出血而帶來(lái)的白細胞,可用下式進(jìn)行校正。每微升CSF內白細胞校正數=每微升CSF未校正的白細胞數-
三、白細胞分類(lèi)計數
1、直接分類(lèi)法:在白細胞直接計數后,轉高倍鏡觀(guān)察,依據細胞形狀和細胞核的形態(tài)進(jìn)行分類(lèi),共計數白細胞和內皮細胞100個(gè),分別計算單個(gè)核細胞和中性粒細胞所占的比例,以百分數表示。如白細胞總數不足100個(gè),則直接寫(xiě)出單個(gè)核細胞和中性粒細胞的具體數字。如白細胞總數在30以下,可不做直接分類(lèi)計數或改用染色分類(lèi)計數。
2、染色分類(lèi)法:腦脊液標本離心,取沉淀涂片,制成均勻薄膜,置室溫或37℃孵箱中,干燥后以瑞氏染色,油鏡下進(jìn)行分類(lèi)計數。以百分比表示之。
四、病原體形態(tài)學(xué)檢查
1、細菌 臨床懷疑流行性腦脊髓膜炎或化膿性腦脊髓膜炎時(shí),應做細菌學(xué)涂片檢查。操作如下:
(1)腦脊液標本2~3ml,以3000rpm離心15分鐘,去上清液,將沉淀物涂在潔凈玻璃片上,共制片2張,涂片自然或在37℃溫箱中干燥固定,且勿用火焰固定。
(2)涂片固定后,一張用亞甲藍染色,另一張用革蘭氏染色。
(3)革蘭氏染色涂片用于檢查肺炎雙球菌、流感桿菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、鏈球菌、大腸桿菌等,亞甲藍染色用于檢查腦膜炎雙球菌。如找到細菌,則按其染色性質(zhì)及形態(tài)報告。
(4)如懷疑結核性腦膜炎,可將腦脊液標本靜置24小時(shí),取其液面薄膜涂片,置37℃溫箱中干燥固定,作抗酸染色,油鏡下找抗酸桿菌。
(5)采集標本時(shí)應注意污染。顯微鏡觀(guān)察時(shí)應注意細胞內外的細菌形態(tài),報告時(shí)應予以描述。
2、真菌檢查—新型隱球菌的檢查
(1)取腦脊液標本,以2000rpm離心10分鐘,沉淀物涂片,加經(jīng)過(guò)過(guò)濾的優(yōu)質(zhì)細墨汁一滴,混合后加蓋玻片顯微鏡下檢查。
(2)先用低倍鏡觀(guān)察,如發(fā)現在黑色背景下有圓形透光小點(diǎn),中間有一細胞大小的圓形物質(zhì),即轉用高倍鏡仔細觀(guān)察其結構,新型隱球菌直徑5~20μm,可見(jiàn)明顯的厚夾膜,周?chē)休^強的折光,并有出芽的球形孢子。
(3)發(fā)現上述特征,即可報告墨汁涂片找到“隱球菌屬”。并須進(jìn)一步作真菌培養。
腦脊液的顯微鏡檢查注意事項
1、檢查前禁忌:無(wú)
2、檢查時(shí)要求:腦脊液細胞計數應及時(shí)進(jìn)行,一般應在1小時(shí)內進(jìn)行;穿刺損傷血管,導致血性腦脊液,細胞總數已無(wú)意義,白細胞計數也須校正后才有意義;細胞計數時(shí),如發(fā)現較多的紅細胞有皺縮或腫脹現象,應予以描述,以協(xié)助臨床醫生鑒別陳舊或新鮮出血;細胞計數時(shí),須注意把紅細胞或淋巴細胞與新型隱球菌相區別:1、新型隱球菌具有“出芽”現象,不溶于乙酸,滴加0.35mol/L的乙酸后,顯微鏡下仍保持原形,而紅細胞則被乙酸溶解消失,淋巴細胞則胞核和胞漿更為明顯。2、滴加印度墨汁一滴,加蓋玻片,高倍鏡下見(jiàn)新型隱球菌有夾膜,不著(zhù)色,而紅細胞或淋巴細胞無(wú)此現象。細胞計數板用完后,應用75%的酒精消毒60分鐘。忌用苯酚消毒,因有損計數池的刻度。
不合宜人群:無(wú)。