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細胞角質(zhì)蛋白19片段

細胞角質(zhì)蛋白19片段概述

細胞角蛋白是細胞體的中間絲,是細胞結構的主要成分,根據其分子量和雙向二維電泳中等電點(diǎn)的不同可以分為20種不同類(lèi)型,它能在正常上皮、腫瘤細胞、細胞培養中分化不同的上皮細胞表達。CYFRA21-1由細胞角蛋白19片段的兩個(gè)單克隆抗體組成,即單抗BMl9-21和KSl9.1,是一個(gè)分子量為4kD的酸性細胞蛋白。它主要分布于單層和復層上皮腫瘤細胞的胞漿內,當細胞死亡時(shí),它以溶解片段的形式釋放入血清中。

細胞角質(zhì)蛋白19片段正常值

  • ≤3.3μg/L。

細胞角質(zhì)蛋白19片段臨床意義

  • (1)肺癌患者,尤其是NSCLC患者的血清及胸水中 CYFRA21-1濃度升高,其敏感性隨病情進(jìn)展而增高,與肺癌的分期呈正相關(guān)。從組織學(xué)的角度來(lái)看,它對鱗癌的敏感性高于腺癌及SCLC。同時(shí),CYFRA21-1也是肺鱗癌生存及復發(fā)的一種獨立預后因素。因此,CYFRA21-1檢測對非小細胞肺癌患者的診斷、病情監視和療效判斷有較高的臨床應用價(jià)值。
    (2)血清CYFlRA21-1增高還可見(jiàn)于乳腺癌、膀胱癌、膽道癌、胰腺癌等腫瘤性疾病,亦可見(jiàn)于少數肺氣腫、支氣管炎、消化性潰瘍、肝良性疾病等。

細胞角質(zhì)蛋白19片段檢查方法

  • 本法分三個(gè)步驟,即抗原與抗體反應、B和F分離和放射性測定。
    (1)抗原與抗體反應:將標本(非標記抗原)、標記抗原和抗血清順序定量加入小試管內,置室溫(15~30℃)作用24h,使其充分競爭結合。
    (2)B、F分離:分離技術(shù)多種多樣,常用沉淀法。
    ①第二抗體沉淀法:又稱(chēng)雙抗體法,在受檢抗原與第一抗體特異性反應后加入相應的第二抗體,使形成的抗原-第一抗體-第二抗體的復合物共沉,一經(jīng)離心即可使結合標記抗原B與游離抗原F分離。本法是特異性沉淀,分離完全,非特異性結合力低。但第二抗體用量較大,成本較高。此外血清濃度、抗凝劑的有無(wú)因素可在一定程度上影響結果。
    ②聚乙二醇(PEG)沉淀法:使蛋白質(zhì)處于等電點(diǎn)狀態(tài),水化層破壞而導致蛋白質(zhì)沉淀。本法優(yōu)點(diǎn)是PEG制備方便、價(jià)廉、分離快速,缺點(diǎn)是非特異沉淀物較多,分離不完全。
    ③第二抗體-聚乙二醇沉淀法:本法既有PEG法的快速沉淀優(yōu)點(diǎn),且保持第二抗體特異性沉淀的作用,又減少第二抗體用量,并降低PEG濃度,使非特異沉淀物減少。
    ④活性炭吸附法:利用活性炭表面活性將小分子的游離部分吸附。如在活性炭表面涂上一層葡聚糖,使它表面具有一定孔徑的網(wǎng)眼,從而允許小分子游離抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子復合物則被排斥在外。在抗原與抗體反應后,加入葡聚糖-活性炭,放置5~10min,使游離抗原吸附在活性炭顆粒上,離心使顆粒沉淀,上清液中含有結合的標記抗原。
    (3)放射性強度測定:B和F分離后,即可測定其放射性強度。測量?jì)x器有兩類(lèi):液體閃爍計數儀(測β射線(xiàn))和晶體閃爍計數儀(測γ射線(xiàn))。計數單位是探測器輸出的電脈沖數,單位為cpm(脈沖數/min)。每次測定均需作一標準曲線(xiàn)圖,以標準抗原的不同濃度為橫坐標,以測到的相應放射性強度為縱坐標作圖。放射性強度可任選B或F,亦可采用計算值B/B+F、B/F或B/B0。標本應作雙份測定,取其平均值,在標準曲線(xiàn)上查出相應的受檢抗原濃度。

細胞角質(zhì)蛋白19片段注意事項

  • 觀(guān)察臨床肺癌手術(shù)及放、化療前后療效的動(dòng)態(tài)監測,是一項重要的輔助指標。

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