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核酸的分子雜交

核酸的分子雜交概述

核酸的分子雜交是定性或定量檢測特異RNA或DNA序列片段的有力工具。它是利用核酸分子的堿基互補原則而發(fā)展起來(lái)的。在堿性環(huán)境中加熱或加入變性劑等條件下,雙鏈DNA之間的氫鍵被破壞(變性),雙鏈解開(kāi)成兩條單鏈。這時(shí)加入異源的DNA或RNA(單鏈)并在一定離子強度和溫度下保溫(復性),若異源DNA或RNA之間的某些區域有互補的堿基序列,則在復性時(shí)可形成雜交的核酸分子。 

核酸的分子雜交正常值

  • 體內菌群的種類(lèi)和比例正常,人體處于動(dòng)態(tài)平衡。 

核酸的分子雜交臨床意義

  • 針對白領(lǐng)族長(cháng)期緊張工作狀態(tài)引起的脂肪肝、肥胖癥、高血脂、心血管病等慢性病進(jìn)行健康篩查,及早發(fā)現潛在的危害健康危險因素,同時(shí)提出全面健康改善方案。
    異常結果各種病原微生物感染導致的病癥以及各種不健康癥狀。
    需要檢查的人群有各種病原微生物感染者、腫瘤或者癌癥患者。 

核酸的分子雜交檢查方法

  • (1) rRNA-DNA雜交:變性rRNA與變性DNA混合時(shí),rRNA與其互補的DNA鏈形成雜交雙鏈,rRNA分子與異源DNA雜交時(shí),也能在其同源區形成互補雙鏈,這種雜交雙鏈的穩定性與其同源性成正相關(guān),適于細菌屬及屬上水平的分類(lèi)研究。現最常用的是硝酸纖維膜結合法。
    (2) 核酸探針技術(shù):
    應用核酸探針技術(shù)檢測病原微生物核酸是臨床診斷學(xué)的重大發(fā)展,其原理是用帶有酶、化學(xué)熒光物、放射性核素或生物素標記的已知序列特定DNA片段(稱(chēng)為探針),在一定條件下,按堿基互補原則探針與待測標本中的核酸雜交,通過(guò)對雜交信號的檢測,從而鑒定標本中有無(wú)相應的病原微生物基因及其分子大小。常用核酸探針技術(shù)有固相雜交(斑點(diǎn)雜交、原位雜交、Southern印跡、Northern印跡等。)和液相雜交技術(shù)。
    核酸探針適用于直接檢出臨床標本中的病原微生物,不受非病原微生物的影響,因此對某些尚不能分離培養或很難分離培養的微生物的檢測具有重要的意義。隨著(zhù)探針標記的不斷改進(jìn),檢測試劑盒商品化,操作更簡(jiǎn)便易行。 

核酸的分子雜交注意事項

  • 不合宜人群: 沒(méi)有。
    檢查前禁忌:注意正常的生活飲食習慣,注意個(gè)人衛生。
    檢查時(shí)要求:積極配合醫生。 

核酸的分子雜交相關(guān)問(wèn)答

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