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T4淋巴細胞亞群

T4淋巴細胞亞群概述

T淋巴細胞表面有多種抗原,其中簇分化(CD)抗原分類(lèi)甚多,這些抗原除了標記細胞的種類(lèi)和分化階段外,同時(shí)也有一定的功能,或作為受體、黏附分子、信號傳遞成分等,可通過(guò)這些表面特征性抗原鑒別亞群。目前開(kāi)展較多的是用抗分化抗原的單克隆抗體,如抗CD4單克隆抗體,對外周血單個(gè)核細胞進(jìn)行檢測,根據出現陽(yáng)性率,判定亞群分布。T淋巴細胞亞群是觀(guān)察機體細胞免疫水平的重要方法,對惡性腫瘤、自身免疫性疾病、免疫缺乏癥、血液系統疾病的診斷、治療及預后判斷有重要價(jià)值。T細胞亞群之間有相互制約和相互輔助的作用,任何一方的增多或減少皆影響另一亞群的形成失調。

T4淋巴細胞亞群正常值

  • 55%~65%。

T4淋巴細胞亞群臨床意義

  • (1)降低:低丙種球蛋白血癥、細菌感染、某些病毒感染。
    (2)升高:急性移植物抗宿主病(GVH)、肉瘤、硬皮病、皮膚黏膜淋巴結綜合征。

T4淋巴細胞亞群檢查方法

  • (1)直接免疫熒光法
    ①取肝素抗凝外周血,用淋巴細胞分層液獲得單個(gè)核細胞,Hank液配成(1~2)×106細胞/ml。
    ②取1ml細胞懸液加入5ml塑料管中,離心2000r/min,2min,棄上清。
    ③加FITC-CD4 20μl,對照管加mIgG-FITC,4℃反應30min。
    ④Hank液洗2次,2000r/min,2min。
    ⑤流式細胞計分析。
    (2)間接免疫熒光法
    ①分離PBMC,調至(1~2)×106細胞/ml。
    ②取1ml細胞懸液于5ml塑料管中,離心2000r/min,2min,棄上清。
    ③加抗CD4單克隆抗體100μl,對照管加抗體稀釋液或正常小鼠IgG,4℃反應30min。
    ④Hank液洗2次,離心2000r/min,2min,棄上清。
    ⑤加50μl FITC-IgG,4℃反應30min。
    ⑥Hank液洗2次,2000r/min,2min。
    ⑦滴片,熒光顯微鏡觀(guān)察或流式細胞計分析。 

T4淋巴細胞亞群注意事項

  • 同B細胞檢測。另外,由于間接免疫熒光技術(shù)所用的羊或兔抗鼠熒光抗體與部分白細胞表面發(fā)生非特異結合,以及Fc受體的非特異細胞反應和多克隆熒光抗體的結合放大效應,從而造成非特異陽(yáng)性熒光細胞增多。而對FITC直標單克隆抗體來(lái)說(shuō),抗體成分、性質(zhì)和結構上完全均一,只要不使蛋白質(zhì)-FITC復合物上帶上過(guò)多的電荷,就不會(huì )產(chǎn)生非特異吸附。目前國外基本上是用直接免疫熒光法,流式細胞計來(lái)分析T細胞亞群的,由于該儀器價(jià)格昂貴,國內尚未普及應用。因而對一般臨床實(shí)驗室來(lái)說(shuō),用免疫熒光顯微鏡也能開(kāi)展這項工作 

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