組織纖溶酶原激活物概述
組織纖溶酶原及貨物是一種單鏈糖蛋白,主要由血管內皮細胞合成、分泌、不斷釋放入血液,廣泛存在于機體的各種組織內,肝臟是組織纖溶酶原激活物滅活的主要場(chǎng)所。它對纖維蛋白有高度的親和力,然后將酪氨酸纖溶酶原形成纖溶酶,降解纖維蛋白(原)和部分凝血因子,是纖溶系統的關(guān)鍵物質(zhì)。降低提示纖溶活性降低。見(jiàn)于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病,如動(dòng)脈血栓形成、深部靜脈血栓形成、缺血性腦卒中等。
組織纖溶酶原激活物正常值
0.3~0.5u/mL。(發(fā)色底物法)
組織纖溶酶原激活物臨床意義
降低提示纖溶活性降低。見(jiàn)于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病,如動(dòng)脈血栓形成、深部靜脈血栓形成、缺血性腦卒中等。
升高提示纖溶活性亢進(jìn),見(jiàn)于原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶亢進(jìn),如彌散性血管內凝血、急性早幼粒細胞白血病、肝病、冠心病、高脂血癥、應激反應等。
組織纖溶酶原激活物檢查方法
抗原測定(t-PA∶Ag)ELISA法:
①用0.05mol/L碳酸鹽緩沖液稀釋t-PA抗體。
②用稀釋緩沖液稀釋抗體-POD結合物。
③用基質(zhì)緩沖液溶解鄰苯二胺(8mg/ml),并加入10μl 30% H2O2。
④將t-PA標準倍比稀釋成10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125IU/ml。
⑤標本稀釋?zhuān)?份檸檬酸鈉抗凝血漿加5份稀釋液。如果估計t-PA值增高,血漿作1∶10稀釋。
⑥用稀釋之t-PA抗體包被ELISA反應板,每孔200μl,溫育過(guò)夜,然后用洗滌液洗3次。
⑦加標準/標本200μl,溫育1h后,同上洗滌3次。
⑧加過(guò)氧化物酶抗體復合物200μl,溫育1h后,同上洗滌3次,洗后立即加基質(zhì)。
⑨每孔加基質(zhì)200μl,顯色10~15min。
⑩加硫酸(3mol/L)50μl或鹽酸(1mol/L)100μl,10min中止反應,于492nm,2h內比色,以稀釋緩沖液為本底。
?據吸光度讀數由標準曲線(xiàn)查得t-PA含量。
組織纖溶酶原激活物注意事項
1、口服避孕藥、劇烈運動(dòng)等可使得組織纖溶酶原激活物升高。
2、組織纖溶酶原激活物有隨年齡增加而升高的趨勢。